RNA 추출
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1. 개요
RNA 추출은 분자생물학 실험에서 RNA 샘플을 분해하는 리보뉴클레이스(RNase) 오염으로 인해 어려움을 겪는 과정이다. RNase는 매우 안정적이고 불활성화하기 어려워 RNA 추출 과정에서 중요한 문제로 작용하며, 세포 내 RNase뿐만 아니라 환경에도 다양한 RNase가 존재한다. RNase는 여러 생물체에서 다양한 세포외 기능을 가지도록 진화했으며, 사람의 피부에서 분비되는 리보뉴클레이스 7과 같은 특정 RNase는 항병원체 방어 작용을 한다. RNA 추출 시 RNase 오염을 방지하기 위해 사용 장비는 철저히 세척하고, 일반 실험실 장비와 분리하여 보관하며, RNase를 파괴하는 화학 물질로 처리하고, 실험자는 맨살이 장비에 닿지 않도록 주의해야 한다.
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| RNA 추출 | |
|---|---|
| 기본 정보 | |
 | |
| 화학식 | (C10H12N4O6)nP |
| 분자량 | 다양함 |
| 개요 | |
| 유형 | 핵산 |
| 구성 단위 | 뉴클레오타이드 |
| 하위 단위 | 리보스 인산 염기 |
| 염기 종류 | 아데닌 구아닌 시토신 유라실 |
| 특징 | |
| 구조 | 단일 가닥 (일부 바이러스는 이중 가닥) |
| 역할 | 유전자 발현 조절 단백질 합성 유전 정보 전달 촉매 작용 |
| 관련 질병 | 암 바이러스 감염 유전 질환 |
| 추출 | |
| 목적 | 연구, 진단, 치료 등 |
| 방법 | 유기 용매 추출 (페놀-클로로포름) 실리카 기반 컬럼 정제 자성 입자 분리 |
| 고려 사항 | RNA 분해 효소 (RNase) 억제 오염 방지 높은 순도 및 수율 확보 |
| 응용 | |
| 연구 분야 | 분자생물학 유전체학 생화학 |
| 진단 분야 | 유전자 검사 감염병 진단 암 진단 |
| 치료 분야 | 유전자 치료 RNAi 치료 백신 개발 |
2. 리보뉴클레이스(RNase) 오염
분자생물학 실험에서 RNA 추출 시 가장 주의해야 할 점 중 하나는 리보뉴클레이스(RNase)에 의한 오염이다.[16][17][18][5] RNase는 RNA를 분해하는 효소로, 매우 안정적이고 어디에나 존재하여 실험 과정을 복잡하게 만든다.[6][7] 특히 RNase는 디옥시리보뉴클레이스(DNase)보다 비활성화하기 어렵기 때문에[16][17][18], RNA 샘플이 의도치 않게 분해될 위험이 크다. 따라서 성공적인 RNA 추출을 위해서는 RNase 오염을 철저히 방지하는 것이 필수적이다.
2. 1. RNase의 특성
분자생물학 실험에서 RNA 추출은 RNA 샘플을 분해하는, 광범위하게 존재하고 견고한 리보뉴클레이스(RNase)의 존재로 인해 매우 복잡하다. 특정 리보뉴클레이스는 매우 견고할 수 있으며 디옥시리보뉴클레이스(DNase)를 중화하는 것과 비교하였을 때 불활성화하는 것이 어렵다. 방출되는 리보뉴클레이스 외에도 환경에 존재하는 여러 리보뉴클레이스가 있다. 리보뉴클레이스는 다양한 생물체에서 많은 세포외 기능을 갖도록 진화해 왔다.[16][17][18][5][6][7] 예를 들어 리보뉴클레이스 A 슈퍼패밀리의 구성원인 리보뉴클레이스 7은 사람의 피부에서 분비되며 강력한 항병원체 방어 작용을 한다.[19][20][8][9] 이러한 분비된 리보뉴클레이스의 경우, 리보뉴클레이스의 외적 기능에 효소 활성이 필요하지 않을 수도 있다. 예를 들어 면역 리보뉴클레이스는 세균의 세포막을 불안정하게 만드는 역할을 한다.[21][22][10][11]이에 대응하기 위해 RNA 추출에 사용되는 장비는 일반적으로 철저하게 세척되고 일반 실험실 장비와 분리되어 보관되며 리보뉴클레이스를 파괴하는 다양한 화학 물질들로 처리된다. 같은 이유로 실험자들도 맨살이 실험 장비에 닿지 않도록 각별히 주의한다.
2. 2. RNase 오염 방지
분자생물학 실험에서 RNA 추출은 RNA 샘플을 분해하는 리보뉴클레이스(RNase) 때문에 복잡한 작업이다. RNase는 어디에나 존재하고 매우 안정적이라 디옥시리보뉴클레이스(DNase)를 비활성화하는 것보다 훨씬 어렵다.[16][17][18][5] 세포 내부에서 방출되는 RNase 외에도, 환경에도 다양한 RNase가 존재한다. RNase는 여러 생물체에서 다양한 세포 외부 기능을 수행하도록 진화해왔다.[6][7] 예를 들어, 사람의 피부에서 분비되는 RNase A 슈퍼패밀리의 일종인 RNase 7은 강력한 항병원체 방어 기능을 한다.[19][20][8][9] 이러한 분비된 RNase의 경우, 효소 활성 자체가 주 기능이 아닐 수도 있다. 예를 들어, 면역 RNase는 세균의 세포막을 불안정하게 만들어 방어 역할을 수행한다.[21][22][10][11]이에 대응하기 위해, RNA 추출에 사용하는 실험 장비는 매우 철저하게 세척하고 일반 실험실 장비와 분리하여 보관해야 한다. 또한, RNase를 파괴할 수 있는 강력한 화학 물질로 처리해야 한다. 실험자 역시 맨살이 장비에 닿지 않도록 각별히 주의해야 한다.
참조
[1]
서적
Circadian Rhythms
[2]
저널
The single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction: twenty-something years on
[3]
저널
Extraction of RNA from cells and tissue
[4]
웹사이트
FortiusBio High Throughput RNA Extraction Filter Paper Card
http://fortiusbio.co[...]
[5]
저널
A type II secreted RNase of Legionella pneumophila facilitates optimal intracellular infection of Hartmannella vermiformis
[6]
저널
T2 Family ribonucleases: Ancient enzymes with diverse roles
[7]
저널
The RNase a superfamily: Generation of diversity and innate host defense
https://zenodo.org/r[...]
[8]
저널
RNase 7, a Novel Innate Immune Defense Antimicrobial Protein of Healthy Human Skin
[9]
저널
RNase 7 Contributes to the Cutaneous Defense against Enterococcus faecium
[10]
저널
The Flexible and Clustered Lysine Residues of Human Ribonuclease 7 Are Critical for Membrane Permeability and Antimicrobial Activity
[11]
저널
RNase a ribonucleases and host defense: An evolving story
[12]
서적
Circadian Rhythms
[13]
저널
The single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction: twenty-something years on
[14]
저널
Extraction of RNA from cells and tissue
[15]
웹인용
FortiusBio High Throughput RNA Extraction Filter Paper Card
http://fortiusbio.co[...]
2022-12-14
[16]
저널
A type II secreted RNase of Legionella pneumophila facilitates optimal intracellular infection of Hartmannella vermiformis
[17]
저널
T2 Family ribonucleases: Ancient enzymes with diverse roles
[18]
저널
The RNase a superfamily: Generation of diversity and innate host defense
https://zenodo.org/r[...]
[19]
저널
RNase 7, a Novel Innate Immune Defense Antimicrobial Protein of Healthy Human Skin
[20]
저널
RNase 7 Contributes to the Cutaneous Defense against Enterococcus faecium
[21]
저널
The Flexible and Clustered Lysine Residues of Human Ribonuclease 7 Are Critical for Membrane Permeability and Antimicrobial Activity
[22]
저널
RNase a ribonucleases and host defense: An evolving story
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