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락테이스

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1. 개요

락테이스는 유당을 분해하는 효소로, 주로 유당 불내증 치료, 아이스크림 제조 등에 사용된다. 락테이스는 락토오스를 갈락토스와 포도당으로 분해하여 소화를 돕고, 유당 불내증 환자가 유제품을 섭취할 수 있도록 돕는다. 사람 락테이스는 약 37°C에서 최적의 활성을 보이며, 유전자 변이에 따라 락테이스의 생성량이 달라져 유당 소화 능력에 차이가 나타난다.

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락테이스
효소 정보
E. coli 락타아제 테트라머
대장균 락타아제 사량체
EC 번호3.2.1.108
CAS 번호9031-11-2
GO 코드0000016
단백질 정보
유전자 기호LCT
대체 기호LAC, LPH, LPH1
HGNC ID6530
염색체2
q
21
유전자 좌위 보충 데이터해당 없음
OMIM603202
Entrez Gene3938
RefSeqNM_002299
UniProtP09848
일반 정보
다른 이름락테이스, LCT
기능젖당 소화 효소

2. 용도

락테이스는 일부 사람들이 소장에서 생성하지 못하는 효소이다.[2] 락토오스(유당) 무첨가 우유, 아이스크림, 요구르트를 생산하는 기술은 1985년 USDA 농업 연구 서비스에 의해 개발되었다.[3] 이 기술은 우유에 락테이스를 첨가하여 우유에 자연적으로 존재하는 락토오스를 가수분해하여 약간 단맛이 나지만 모든 사람이 소화할 수 있도록 하는 데 사용된다.[4] 락테이스가 없으면 유당 불내증이 있는 사람은 소화되지 않은 락토오스를 대장으로 보내는데,[5] 여기서 박테리아가 락토오스를 분해하여 이산화탄소를 생성하여 복부 팽만감과 가스를 유발한다.

락테이스 보충제는 유당 불내증 치료에 사용될 수 있다.[6]

상업적으로 생산되는 락테이스는 ''Kluyveromyces fragilis'' 및 ''Kluyveromyces lactis''와 같은 효모와 ''Aspergillus niger'' 및 ''Aspergillus oryzae''와 같은 곰팡이에서 추출할 수 있다.[7] 보충제에서 락테이스의 주요 상업적 사용은 우유의 유당을 분해하여 유당 불내증이 있는 사람들이 섭취할 수 있도록 하는 것이다.[8][9] 미국 식품의약국(U.S. Food and Drug Administration)은 이러한 제품에 대해 독립적인 평가를 하지 않았다.[10]

락테이스는 ''Kluyveromyces marxianus'', ''Kluyveromyces lactis''와 같은 효모, ''Aspergillus niger'', Aspergillus oryzae와 같은 균류로부터 얻어진다.[30] 이는 유당 불내증을 겪는 사람들을 위해 유당을 분해한 우유를 만드는 데 사용된다. 또한, 아이스크림 제조에도 사용된다. 이는 유당보다 갈락토스와 포도당이 감미가 더 강하기 때문이다. 락테이스는 유청을 시럽으로 변환하는 데에도 사용된다.

3. 메커니즘

사람 락테이스의 최적 온도는 약 37°C이며,[13] pH 최적 값은 6이다.[14]

신진대사에서 D-젖당의 β-글리코사이드 결합은 가수분해되어 D-갈락토스와 D-포도당을 생성하며, 이들은 장벽을 통해 혈류로 흡수될 수 있다. 락테이스가 촉매하는 전체 반응은 다음과 같다.

: C12H22O11 + H2O → C6H12O6 + C6H12O6 + 열

: 젖당 + H2O → β-D-갈락토스 + D-포도당

D-젖당 가수분해의 촉매 메커니즘은 생성물에서 기질의 아노머 구성을 유지한다.[15] 메커니즘의 세부 사항은 불확실하지만, 입체 화학적 유지는 이중 치환 반응을 통해 달성된다. ''대장균''(E. coli) 락테이스 연구에 따르면, 가수분해는 효소의 글루탐산 염기성 친핵체가 β-글리코사이드 결합에서 갈락토실 탄소의 축 방향에서 공격할 때 시작된다.[16] D-포도당 이탈기의 제거는 Mg 의존성 산 촉매 작용에 의해 촉진될 수 있다.[2] 효소는 물에 의한 적도 친핵성 공격 시 α-갈락토실 부분으로부터 해리되어 D-갈락토스를 생성한다.[2]

기질 변형 연구에 따르면 갈락토피라노스 고리의 3′-OH 및 2′-OH 잔기는 효소 인식 및 가수분해에 필수적이다.[17] 3′-히드록시기는 기질과의 초기 결합에 관여하는 반면, 2′-기는 인식에는 필요하지 않지만 후속 단계에 필요하다. 이는 2-데옥시 유사체가 효과적인 경쟁적 억제제(Ki = 10mM)라는 사실로 입증된다.[2] 글루코피라노스 부분의 특정 수산기를 제거해도 촉매 작용이 제거되지 않는다.[2]

락테이스 효소에 의한 젖당 가수분해 제안 메커니즘


락테이스는 또한 플로리진을 플로레틴과 포도당으로의 전환을 촉매한다.

4. 구조 및 생합성

전구 락테이스는 1927개의 아미노산으로 구성된 단일 폴리펩타이드 1차 구조를 갖는 최초의 번역 산물이다.[18] 이는 (i) 19개의 아미노산으로 절단된 신호 서열, (ii) 성숙 락테이스에는 없는 큰 프로서열 도메인, (iii) 성숙 락테이스 분절, (iv) 막 관통 소수성 앵커, (v) 짧은 친수성 카르복시 말단으로 나눌 수 있다.[2] 신호 서열은 소포체에서 절단되며, 그 결과 215kDa의 프로-LPH는 골지체로 보내져 심하게 당화되고 프로테올리틱 공정을 거쳐 성숙 형태가 된다.[19] 프로도메인은 ER에서 분자 내 샤페론 역할을 하여 트립신 절단을 방지하고 LPH가 골지체로 수송되는 데 필요한 3차원 구조를 채택하도록 하는 것으로 나타났다.[20]

성숙한 인간 락테이스는 장 상피 세포의 붓 경계 막에 국소화되는 단일 160kDa 폴리펩타이드 사슬로 구성된다. 이는 N-말단이 세포 외부에 있고 C-말단이 세포질에 있도록 정렬되어 있다.[2] LPH는 두 개의 촉매 글루탐산 부위를 포함한다. 인간 효소에서 락테이스 활성은 Glu-1749와 관련이 있는 반면, Glu-1273은 플로리진 가수분해효소 기능의 부위이다.[21]

5. 유전적 발현 및 조절

사람의 경우, 락테이스는 2번 염색체에 있는 단일 유전자 좌위에 의해 암호화된다.[22] 이는 포유류 소장의 장세포에서만 발현되며, 태아 발달 동안 결장에서 매우 낮은 수준으로 발현된다. 인간은 높은 수준의 락테이스 발현을 가지고 태어난다. 세계 인구의 대다수에서 락테이스 전사는 이유 후 하향 조절되어 소장에서 락테이스 발현이 감소하며,[2] 이는 성인형 저유당 분해 효소증 또는 유당불내증의 일반적인 증상을 유발한다.[23] ''LCT'' 유전자는 락테이스를 만드는 지침을 제공한다. 영아의 유당 불내증(선천성 락테이스 결핍증)은 ''LCT'' 유전자의 돌연변이에 의해 발생한다. 돌연변이는 락테이스의 기능을 방해하여 영향을 받은 영아가 모유나 분유의 유당을 소화하는 능력이 심각하게 손상되는 것으로 여겨진다.[24]

일부 인구 집단은 5,000~10,000년 전에 발생한 것으로 추정되는 돌연변이로 인해 락테이스 지속성을 나타내며, 이는 소의 가축화의 증가와 일치한다.[25] 이 돌연변이는 세계 인구의 거의 절반이 증상 없이 유당을 대사할 수 있도록 했다. 연구에 따르면 락테이스 지속성의 발생은 LPH 유전자의 5'-말단에서 약 14 및 22킬로베이스 상류에 있는 두 개의 서로 다른 단일 염기 다형성과 관련이 있다.[26] -13910 위치에서 C→T 돌연변이와 -22018 위치에서 G→A 돌연변이 모두 독립적으로 락테이스 지속성과 연관되어 있다.[27]

락테이스 프로모터는 150개의 염기쌍 길이를 가지며 전사 개시 부위의 상류에 위치한다.[2] 이 서열은 포유류에서 고도로 보존되어 있어 중요한 시스-전사 조절 인자가 근처에 위치하고 있음을 시사한다.[2] Cdx-2, HNF-1α, 및 GATA가 전사 인자로 확인되었다.[2] 저유당 분해 효소증 발병에 대한 연구는 다형성에도 불구하고 영아의 락테이스 발현에 거의 차이가 없음을 보여주며, 이는 돌연변이가 발달 동안 점점 더 중요해진다는 것을 보여준다.[28] 발달적으로 조절되는 DNA 결합 단백질은 전사를 하향 조절하거나 mRNA 전사체를 불안정하게 하여 이유 후 LPH 발현을 감소시킬 수 있다.[2]

참조

[1] 논문 Molecular genetics of human lactase deficiencies
[2] 웹사이트 Lactose Intolerance https://www.mayoclin[...] 2018-03-13
[3] 웹사이트 Lactose-Free Milk, Low-Fat Cheese, and More Dairy Breakthroughs https://www.federall[...] 2018-04-12
[4] 뉴스 Asked: How do dairies make lactose-free milk? https://www.azcentra[...] 2014-09-03
[5] 웹사이트 Lactose intolerance - Symptoms and causes https://www.mayoclin[...]
[6] 웹사이트 Lactose Intolerance https://www.niddk.ni[...] 2014-06
[7] 논문 Production of Lactase by ''Trichoderma'' sp. https://hrcak.srce.h[...]
[8] 웹사이트 GRAS Notification for Acid Lactase from ''Aspergillus oryzae'' Expressed in ''Aspergillus niger'' https://www.fda.gov/[...] 2014-04-03
[9] 서적 New Crops, New Uses, New Markets: 1992 Yearbook of Agriculture U.S. Department of Agriculture
[10] 웹사이트 Agency Response Letter GRAS Notice No. GRN 000132 https://www.fda.gov/[...] U.S. Food and Drug Administration 2003-12-12
[11] 웹사이트 Introduction https://lactaseinbio[...] Universiti Teknologi Malaysia 2013-03
[12] 웹사이트 pBluescript II KS(+/−), pBluescript II SK(+/−): description & restriction map http://www.fermentas[...] Fermentas
[13] 논문 Optimizing the enzymatic synthesis of β-D-galactopyranosyl-D-xyloses for their use in the evaluation of lactase activity ''in vivo'' 2007-07
[14] 논문 Purification and characterisation of amphiphilic lactase/phlorizin hydrolase from human small intestine 1981-03
[15] 논문 Catalytic mechanisms of enzymic glycosyl transfer 1990-11
[16] 논문 A structural view of the action of ''Escherichia coli'' (lacZ) β-galactosidase 2001-12
[17] 논문 Substrate specificity of small-intestinal lactase: study of the steric effects and hydrogen bonds involved in enzyme-substrate interaction 1995-07
[18] 논문 Complete primary structure of human and rabbit lactase-phlorizin hydrolase: implications for biosynthesis, membrane anchoring and evolution of the enzyme 1988-09
[19] 논문 Biosynthesis and maturation of lactase-phlorizin hydrolase in the human small intestinal epithelial cells 1987-01
[20] 논문 The pro region of human intestinal lactase-phlorizin hydrolase 1994-10
[21] 논문 Intestinal lactase-phlorizin hydrolase (LPH): the two catalytic sites; the role of the pancreas in pro-LPH maturation 1998-09
[22] 논문 Regulation of lactase-phlorizin hydrolase gene expression by the caudal-related homoeodomain protein Cdx-2 1997-03
[23] 웹사이트 LCT gene https://ghr.nlm.nih.[...]
[24] 웹사이트 Lactose intolerance: MedlinePlus Genetics https://medlineplus.[...]
[25] 논문 Genetic signatures of strong recent positive selection at the lactase gene 2004-06
[26] 논문 Transcriptional regulation of the lactase-phlorizin hydrolase gene by polymorphisms associated with adult-type hypolactasia 2003-05
[27] 논문 Adult-type hypolactasia and regulation of lactase expression 2005-05
[28] 논문 The genetically programmed down-regulation of lactase in children 1998-06
[29] 논문 Digestive Enzyme Supplementation in Gastrointestinal Diseases https://www.ncbi.nlm[...] 2016
[30] 간행물 Production of lactase by ''Trichoderma sp.. Food Technol Biotechnol'' 2004



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