역전사

1. 본문

역전사(Reverse Transcription)는 RNA의 유전 정보를 역전사 효소(Reverse Transcriptase)를 이용하여 DNA로 전달하는 과정입니다. 이 과정은 역전사 효소를 가진 레트로바이러스(Retrovirus)에서 발견되는 현상입니다.
핵심 내용:

• 역전사: RNA를 주형으로 하여 상보적인 DNA(cDNA)를 합성하는 과정입니다.
• 역전사 효소: RNA 의존성 DNA 중합효소라고도 불리며, RNA를 주형으로 DNA를 합성하는 효소입니다. 레트로바이러스가 이 효소를 가지고 있습니다.
• cDNA (complementary DNA): 역전사 효소에 의해 RNA로부터 합성된 DNA입니다.
• RT-PCR (Reverse Transcription-PCR): 역전사 과정을 거쳐 cDNA를 합성하고, 이 cDNA를 주형으로 PCR(중합효소 연쇄 반응)을 수행하는 기술입니다. RNA를 연구하기 위한 과정 전체를 일컫습니다.

역전사가 필요한 이유:

• RNA는 불안정하고 RNase에 의해 쉽게 분해되기 때문에, 안정적인 DNA 형태로 변환하여 연구하는 것이 유리합니다.
• In vitro(시험관 내)에서 RNA 자체는 증폭할 수 없으므로, DNA로 역전환하여 증폭 및 분석을 수행합니다.
• cDNA는 RNA 연구를 위한 다운스트림 응용에 안정적인 주형이 됩니다.

역전사 반응의 구성 요소:1. RNA

2. 역전사 효소(RTase), 반응 완충액(reaction buffer)

3. 프라이머(Primer)

4. dNTP 혼합물

5. RNase 억제제 (선택 사항)
응용 분야:

• RT-PCR: RNA를 정량, 검출하는 데 사용됩니다.
• 마이크로어레이: 유전자 발현 양상을 분석하는 데 사용됩니다.
• 유전자 클로닝: cDNA 라이브러리 제작 등에 사용됩니다.
• 질병 진단: 혈액이나 체액에서 분리된 RNA로부터 특정 질병을 진단하는 의료용 임상 진단 키트에 활용됩니다.

참고: DNA의 유전 정보가 RNA로 전달되는 과정은 "전사(Transcription)"라고 하며, 역전사와는 반대되는 과정입니다.