293T
1. 개요
293T는 플라스미드 pRSV-1609를 포함하는 세포주로, 네오마이신/G418 내성 및 SV40 대형 T 항원의 tsA1609 대립 유전자를 발현하도록 형질주입되었다. 이 대립 유전자는 33°C에서 완전히 활성화되며, 37°C에서도 기능하지만 40°C 이상에서는 비활성화된다. 293T는 DNA 형질주입 효율이 높으며, SV40 대형 T 항원 발현으로 인해 SV40 복제 기점을 가진 플라스미드 DNA를 복제할 수 있어 재조합 단백질 또는 레트로바이러스 생산량을 증가시킬 수 있다. 또한, 293T의 세 가지 분리체의 전체 게놈 서열이 분석되었으며, 모체인 HEK 293 세포주와 차이를 보인다.
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인간 세포주 -
헬라 세포
헬라 세포는 1951년 헨리에타 랙스라는 자궁경부암 환자의 종양에서 유래된 최초의 인간 불멸 세포주로, 의학 연구에 큰 기여를 했지만 환자의 동의 없이 채취 및 사용되어 윤리적 논란을 야기했다. -
인간 세포주 -
인간 탯줄 정맥 내피 세포
인간 탯줄 정맥 내피 세포(HUVEC)는 혈관 신생, 혈관 내피 성장 인자 반응, 거대 분자 전달 연구 등에 중요한 역할을 하는 쉽게 얻을 수 있는 혈관 내피 세포로, 약물 스크리닝, 질병 모델링, 유전자 치료 연구에도 기여하며 다양한 생리학적 과정 연구에 활용되지만, 생체 내 환경과의 차이로 연구 결과 해석에 주의가 필요하다.
2. 형질
293T 세포주는 플라스미드 pRSV-1609를 형질주입하여 만들어졌으며, 네오마이신/G418 내성과 SV40 대형 T 항원의 tsA1609 대립유전자 발현 형질을 갖는다. 이 대립유전자는 33°C에서 완전히 활성화되고, 37°C에서 부분적으로 기능하며, 40°C 이상에서는 비활성화된다. 293T는 HEK 293 세포처럼 DNA 형질주입 효율이 매우 높다. SV40 대형 T 항원 발현으로 인해 SV40 복제기점을 포함하는 플라스미드는 293T 세포 내에서 복제되어 일시적으로 높은 복제 수를 유지하며, 이는 재조합 단백질 또는 레트로바이러스 생산량을 크게 증가시킨다.
2.1. SV40 대형 T 항원
293T 세포주에 도입된 SV40 대형 T 항원의 tsA1609 대립유전자는 33°C에서 완전히 활성화된다. 37°C에서는 일부 기능하지만, 40°C 이상에서는 비활성화된다. SV40 대형 T 항원의 발현은 SV40 복제기점을 가진 형질주입된 플라스미드 DNA가 293T에서 복제되도록 하여, 일시적으로 높은 복제 수를 유지하게 한다. 이러한 특성은 세포에서 생산될 수 있는 재조합 단백질 또는 레트로바이러스의 양을 크게 증가시킬 수 있다. 293T는 DNA로 매우 효율적으로 형질주입 될 수 있다.
2.1.1. 온도 민감성
플라스미드 pRSV-1609를 포함하는 293T 세포를 생성하는 데 사용된 형질주입은 네오마이신/G418 내성 및 SV40 대형 T 항원의 tsA1609 대립유전자의 발현을 부여했다. 이 대립유전자는 33°C에서 완전히 활성화되고, 37°C에서 실질적인 기능을 하지만, 40°C 이상에서는 비활성 상태가 된다.