293T
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1. 개요
293T는 플라스미드 pRSV-1609를 포함하는 세포주로, 네오마이신/G418 내성 및 SV40 대형 T 항원의 tsA1609 대립 유전자를 발현하도록 형질주입되었다. 이 대립 유전자는 33°C에서 완전히 활성화되며, 37°C에서도 기능하지만 40°C 이상에서는 비활성화된다. 293T는 DNA 형질주입 효율이 높으며, SV40 대형 T 항원 발현으로 인해 SV40 복제 기점을 가진 플라스미드 DNA를 복제할 수 있어 재조합 단백질 또는 레트로바이러스 생산량을 증가시킬 수 있다. 또한, 293T의 세 가지 분리체의 전체 게놈 서열이 분석되었으며, 모체인 HEK 293 세포주와 차이를 보인다.
293T 세포주는 플라스미드 pRSV-1609를 형질주입하여 만들어졌으며, 네오마이신/G418 내성과 SV40 대형 T 항원의 tsA1609 대립유전자 발현 형질을 갖는다. 이 대립유전자는 33°C에서 완전히 활성화되고, 37°C에서 부분적으로 기능하며, 40°C 이상에서는 비활성화된다.[2] 293T는 HEK 293 세포처럼 DNA 형질주입 효율이 매우 높다. SV40 대형 T 항원 발현으로 인해 SV40 복제기점을 포함하는 플라스미드는 293T 세포 내에서 복제되어 일시적으로 높은 복제 수를 유지하며, 이는 재조합 단백질 또는 레트로바이러스 생산량을 크게 증가시킨다.
293T 세포주의 게놈 서열은 모체 세포주인 HEK 293과 비교했을 때 차이를 보인다.[3]
2. 형질
2. 1. SV40 대형 T 항원
293T 세포주에 도입된 SV40 대형 T 항원의 tsA1609 대립유전자는 33°C에서 완전히 활성화된다. 37°C에서는 일부 기능하지만, 40°C 이상에서는 비활성화된다.[2] SV40 대형 T 항원의 발현은 SV40 복제기점을 가진 형질주입된 플라스미드 DNA가 293T에서 복제되도록 하여, 일시적으로 높은 복제 수를 유지하게 한다. 이러한 특성은 세포에서 생산될 수 있는 재조합 단백질 또는 레트로바이러스의 양을 크게 증가시킬 수 있다. 293T는 DNA로 매우 효율적으로 형질주입 될 수 있다.[2]
2. 1. 1. 온도 민감성
플라스미드 pRSV-1609를 포함하는 293T 세포를 생성하는 데 사용된 형질주입은 네오마이신/G418 내성 및 SV40 대형 T 항원의 tsA1609 대립유전자의 발현을 부여했다. 이 대립유전자는 33°C에서 완전히 활성화되고, 37°C에서 실질적인 기능을 하지만, 40°C 이상에서는 비활성 상태가 된다.[2]
2. 1. 2. 플라스미드 DNA 복제
형질주입된 플라스미드 pRSV-1609는 SV40 대형 T 항원의 tsA1609 대립유전자 발현을 통해 293T 세포에서 33°C에서 완전히 활성화되고, 37°C에서 부분적으로 활성화되며, 40°C 이상에서는 비활성화된다.[2] SV40 대형 T 항원의 발현으로 SV40 복제기점을 포함하는 형질주입된 플라스미드 DNA는 293T에서 복제될 수 있어 일시적으로 높은 복제 수를 유지한다. 이는 세포에서 생산되는 재조합 단백질 또는 레트로바이러스의 양을 크게 증가시킬 수 있다.
3. 게놈
3. 1. 게놈 서열 분석
293T의 세 가지 다른 분리체의 전체 게놈 서열이 결정되었다. 이들은 서로 매우 유사하지만 모체 HEK 293 세포주에서 감지 가능한 차이를 보인다.[3]
3. 2. HEK 293과의 비교
293T의 세 가지 다른 분리체의 전체 게놈 서열이 결정되었다. 이들은 서로 매우 유사하지만 모체 HEK 293 세포주와 비교했을 때 감지할 수 있는 차이를 보인다.[3]
참조
[1]
논문
Production of high-titer helper-free retroviruses by transient transfection
1993-09-15
[2]
논문
A mammalian host-vector system that regulates expression and amplification of transfected genes by temperature induction
https://archive.org/[...]
1985-01-04
[3]
논문
Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations
2014-09-03
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