저온생물학
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1. 개요
저온생물학은 저온이 생물체에 미치는 영향을 연구하는 학문 분야이다. 기원전 고대 이집트에서 의학적 목적으로 저온을 사용한 기록에서 시작되어, 1949년 글리세린을 이용한 생체 물질 냉동 보존 기술 발전으로 이어졌다. 연구 분야는 생물학적 연구와 응용 연구로 나뉘며, 생물학적 연구에서는 동결 보호제, 부동 단백질, 겨울잠 메커니즘 등을 연구하고, 응용 연구에서는 장기 및 세포 보존, 생식세포 및 배아의 초저온 보존, 치료적 저체온증 등을 연구한다. 저온생물학회는 1964년 설립되어 이 분야 연구를 장려하며, 주요 학술지로는 '저온생물학' 등이 있다.
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저온생물학 | |
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기본 정보 | |
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학문 분야 | 생물학 |
연구 대상 | 극저온이 생명체에 미치는 영향 |
상세 정보 | |
관련 분야 | 극저온학 동결건조 장기이식 인공 수정 |
응용 분야 | 혈액 은행 정자 은행 난자 은행 줄기 세포 보관 조직 공학 식품 보존 동물 보존 |
주요 연구 내용 | 저온에서의 생존 메커니즘 연구 세포 및 조직의 동결 보존 방법 개발 장기 이식을 위한 장기 보존 기술 개발 저온이 생명체에 미치는 영향 연구 부동액 단백질 연구 유리화 연구 가역 정지 연구 냉동 인간 연구 |
역사 | |
주요 인물 | 라자로 스팔란차니 (Lazzaro Spallanzani) 장 로스탕 (Jean Rostand) 크리스토퍼 폴지 (Christopher Polge) 배질 루야트 (Basil Luyet) 피터 마주어 (Peter Mazur) |
기타 | |
관련 학회 | 국제 저온생물학회 (Society for Cryobiology) |
2. 역사
저온생물학의 역사는 고대까지 거슬러 올라간다. 기원전 2500년경 이집트에서는 의학에 저온을 사용했다는 기록이 있다. 히포크라테스는 출혈과 부기를 멈추기 위해 냉기를 권장했다. 근대에 들어와 17세기 영국의 로버트 보일은 저온이 동물에 미치는 영향을 연구했다.
저온생물학은 다양한 연구 분야를 포함하며, 주요 연구 분야는 다음과 같이 6가지로 구분할 수 있다.[1][2]
1949년 영국 국립 의학 연구소의 크리스토퍼 폴지(Christopher Polge)와 앤드루 스미스(Audrey Smith)는 글리세린 첨가가 소 정액의 냉동 보존 개선에 매우 효과적이라는 사실을 우연히 발견했다.[14] 이는 생물체의 저온 보존 기술에 있어 큰 돌파구가 되었다. 그 후, 정자, 난자, 배아, 혈액 성분 등에 대해 액체 질소를 이용한 보존 기술이 확립되었다.
3. 연구 분야
번호 연구 분야 설명 1 냉해 적응 연구 미생물, 식물(내한성), 무척추동물 및 척추동물(동면 포함)의 냉해 적응을 연구한다. 2 동결 보존 세포, 조직, 생식 세포, 배아를 동결 및 해동 과정에서 세포를 보호하는 물질(동결보호제)을 첨가하여 장기간 보존한다. 3 장기 보존 장기 이식을 위한 저체온 상태에서 장기를 보존한다. 4 동결 건조 의약품을 동결 건조한다. 5 극저온 수술 극저온 가스/액체를 사용하여 건강하지 않은 조직을 파괴하는 (최소 침습적) 방법을 연구한다. 6 물리학 및 기계 공학적 측면 연구 생물학적 시스템에 적용되는 과냉각, 얼음 핵생성/성장 및 냉각/가열 중 열 전달의 기계 공학적 측면을 연구한다.
이러한 연구 분야들은 극저온학에 의존하기도 한다.
저온생물학은 미생물, 식물, 동물 등의 단백질, 세포, 조직, 기관과 같은 각 분류에 대해 다양한 온도 영역에서 저온 상태의 특성을 연구하며, 특히 사람의 배아(수정란), 세포, 조직 등의 보존 기술 연구에 주력한다.[3]
1949년 영국 국립 의학 연구소의 크리스토퍼 폴지와 앤드루 스미스에 의해 글리세린 첨가가 소의 정액 냉동 보존 개선에 매우 효과적이라는 사실이 우연히 발견되면서, 생물의 저온 보존 기술에 큰 발전이 있었다.[4] 이후 정자, 난자, 배아, 혈액 성분 등에 대한 액체 질소를 이용한 보존 기술이 확립되었으며, 현재는 심장 등 장기 이식을 위한 보존 기술에 대한 연구가 진행 중이다.[5]
동물 세포의 탈수 및 해동에 대한 기본적인 이론으로는 한 번에 냉동하여 빙정이 성장하기 전에 냉동을 완료하거나, 서서히 냉동하여 조대한 빙정이 석출되지 않도록 하는 것이 있다.[6]
당류 용액 등을 이용해 고삼투압 상태를 만들거나, 트레할로스를 사용하고 디메틸 설폭사이드를 용매로 사용하는 등 빙정의 성장을 억제하는 방법, 동결건조, 수분을 글리세린 등으로 치환하여 유리화시키는 방법 등이 알려져 있다. 글리세린 치환은 세포가 유리 전이 온도를 획득하게 하여 냉동 시 세포 내 빙정 생성을 억제하고, 빙정 성장으로 인한 조직 파괴를 방지한다. 이러한 목적에 첨가하는 물질을 동해 방어제(cryoprotective agent, CPA)라고 부른다.[7]
식물의 경우, 유전자원 보존을 위해 종묘나 조직의 저온 보존이 이루어진다. 종자나 화분은 냉동 상태에서 수년 이상 보존 가능한 경우가 많으며, 경대 재배와 병행하여 유전자원 보존이 이루어진다. 조직 절편은 동물 세포와 동일한 방법으로 보존되며, 가지, 주 단위 상태에서는 예비 냉동 및 고삼투압 물질 처리 등의 방법이 연구되고 있지만, 아직 발전 단계에 있다. 또한, 생육 중인 식물에 당류나 프롤린을 사용하면 저온 스트레스에 대한 내성이 증강된다는 연구 결과도 있다.[8]
3. 1. 생물학적 연구
많은 생물은 물의 어는점 이하 온도에서 장기간 생존할 수 있다. 대부분의 생물은 날카로운 얼음 결정에 의한 서리 피해로부터 스스로를 보호하기 위해 동결 보호제인 부동 단백질, 폴리올, 포도당 등을 축적한다. 특히 대부분의 식물은 −4 °C에서 −12 °C의 온도까지 안전하게 도달할 수 있다.
동식물 개체 단위 연구에서는 극한지 동식물의 내저온 메커니즘, 겨울잠 메커니즘, 내저온 유전자 연구 및 이들의 인위적 조작 응용 등이 이루어지고 있다. 겨울잠을 자는 동물은 지방의 불포화도를 높여 지방 응결을 방지하며, 저온 해역에 서식하는 어류는 부동 단백질(Antifreeze protein, AFP)을 통해 조직액에서 빙정 성장을 억제한다. 이러한 지견들은 현재 응용 및 실용화 연구가 진행 중이다.[8][9][10][11][12][13]
3. 2. 응용 연구
세포, 조직, 장기 보존을 위한 연구가 진행 중이다. 일반적으로 동결 및 해동 과정에서 세포를 보호하는 물질(동결보호제)을 첨가하여, 세포, 조직, 생식 세포, 배아를 동결 보존한다.[14] 심장과 같은 큰 장기는 장기 이식을 위해 짧은 시간 동안만 시원하지만 얼지 않는 온도에서 보관 및 운송된다. 세포 현탁액(혈액 및 정액)과 얇은 조직 절편은 액체 질소 온도(극저온 보존)에서 거의 무기한으로 보관할 수 있다. 인간의 정자, 난자 및 배아는 생식 연구 및 치료에 일상적으로 보관된다.
1970년대 초에 조절 속도 및 서서히 냉동 기술이 개척되었고, 1984년 첫 인간 배아 냉동 출생(조이 레이랜드)이 가능하게 되었다. 프로그래밍 가능한 단계 또는 조절 속도를 사용하여 생물학적 샘플을 냉동시키는 기계는 인간, 동물 및 세포 생물학에 사용되기 시작했다. 액체 질소에서 깊이 냉동되거나 극저온 보존되기 전에 샘플을 '냉동'하여 해동될 때 더 잘 보존할 수 있게 되었다. 이러한 기계는 병원, 수의학 실습 및 연구 실험실에서 난자, 피부, 혈액 제제, 배아, 정자, 줄기 세포 및 일반적인 조직 보존에 사용된다. '서서히 냉동'된 배아로부터의 생존 출생 수는 약 30만에서 40만 명으로 추정되며, 이는 300만 명의 체외 수정 출생의 20%를 차지한다. 1986년 호주 출신의 크리스토퍼 첸 박사는 영국 제어 속도 냉동고에서 서서히 냉동된 난자를 사용하여 세계 최초의 임신 사례를 보고했다.
냉동 수술은 극저온 가스/액체를 사용하여 건강하지 않은 조직을 파괴하는 최소 침습적 치료법이다. 1845년 제임스 아르노트가 암 환자를 대상으로 처음 시행했다.
치료적 저체온증은 심장 수술 등에서 저체온 상태를 유도하여 수술 시간을 연장하고 환자의 회복률을 향상시킨다. 저체온 보관은 일반적으로 0 °C 이상이지만, 포유류의 정상 체온(32 °C ~ 37 °C)보다는 낮다. 저체온 보관의 경험 법칙은 온도가 10 °C 감소할 때마다 산소 소비가 50% 감소한다는 것이다.[15] 동면 동물은 저체온증과 관련된 신진대사 불균형을 피하기 위한 메커니즘을 가지고 있지만, 이식을 위해 유지되는 저체온 장기와 조직은 산증, 저하된 나트륨 펌프 활동, 그리고 증가된 세포 내 칼슘에 대항하기 위한 특별한 보존 용액이 필요하다. 이러한 목적으로 비아스판(University of Wisconsin solution), HTK, 그리고 쎌시어와 같은 특별한 장기 보존 용액이 설계되었다.[16]
세포의 동결 보존은 미국의 저온생물학자 [https://www.physics.iupui.edu/~starman/Starman/Cryobiology/Mazur/Mazur.htm 피터 마주어]의 "두 요인 가설"에 의해 안내되는데, 이는 과도하게 빠른 냉각은 세포 내 얼음 형성에 의해 세포를 죽이고, 과도하게 느린 냉각은 전해질 독성 또는 기계적 압착에 의해 세포를 죽인다고 말한다.[17] 적혈구의 경우, 최적의 냉각 속도는 매우 빠르며(초당 거의 100 °C), 줄기 세포의 경우 최적의 냉각 속도는 매우 느리다(분당 1 °C). 디메틸 설폭사이드와 글리세롤과 같은 동결 보호제가 세포를 동결로부터 보호하는 데 사용된다.[18]
인간의 생식세포와 2세포, 4세포, 8세포 배아는 잘 통제된 실험실 조건에서 -196°C에서 10년 동안 초저온 보존될 수 있다.[19] 불임과 관련된 인간의 초저온 보존은 배아, 정자 또는 난자를 냉동을 통해 보존하는 것을 포함한다. 2004년, 벨기에 루뱅의 도네즈는 냉동 난소 조직에서 첫 번째 성공적인 출산을 보고했다. 1997년, 호지킨 림프종을 앓고 있는 여성으로부터 난소 피질의 샘플을 채취하여 초저온 보존한 후 액체 질소에 보관했다. 환자가 조기 난소 부전을 겪은 후 화학 요법이 시작되었다. 2003년, 냉동-해동 후, 복강경을 통해 난소 피질 조직의 정위 자가 이식이 이루어졌고, 5개월 후, 재이식 징후는 규칙적인 배란 주기의 회복을 나타냈다. 재이식 11개월 후, 생존 가능한 자궁 내 임신이 확인되었고, 이는 그러한 첫 번째 생존 출산인 타마라라는 이름의 여자아이를 낳았다.[20]
4. 관련 학회 및 저널
저온생물학회는 저온이 생물학적 시스템에 미치는 영향에 공통적인 관심을 가진 생물학, 의학, 물리 과학 분야의 사람들을 모으기 위해 1964년에 설립되었다. 2007년 현재, 저온생물학회는 전 세계 약 280명의 회원을 보유하고 있으며, 그중 절반이 미국에 기반을 두고 있다.[21] 이 학회는 저온 생물학의 모든 측면에 전념하는 연례 과학 회의를 개최하며, 회원들은 학회 뉴스레터인 '뉴스 노트(News Notes)'를 통해 소식과 예정된 회의에 대한 정보를 얻는다. 2011~2012년 저온생물학회 회장은 존 H. 크로우(John H. Crowe)였다.[22]
1964년에 설립되어 2003년에 등록된 자선 단체가 된[23] 이 학회는 2006년 현재 약 130명의 회원(대부분 영국 및 유럽 출신)을 보유하고 있으며, 적어도 연례 총회를 1회 개최한다. 학회 프로그램에는 일반적으로 주제별 심포지엄과 저온 생물학의 모든 측면에 대한 자유로운 소통 세션이 포함된다.
참조
[1]
논문
Ice Nucleation Induced by Pseudomonas syringae
[2]
논문
Ice nucleation and antinucleation in nature
[3]
웹사이트
Food Safety Watch
http://www.foodsafet[...]
2013-09-12
[4]
문서
Managing plant genetic resources using low and ultra-low temperature storage: a case study of tomato
[5]
문서
Cryopreservation of endangered ornamental plants and fruit crops from tropical and subtropical regions
[6]
뉴스
Scientist finds fungus gnats survive winter half-frozen
http://www.adn.com/l[...]
2009-05-30
[7]
웹사이트
Alaska beetles survive 'unearthly' temperatures
http://www.gi.alaska[...]
2009-10-26
[8]
웹사이트
Lithobates sylvaticus (Wood Frog)
https://animaldivers[...]
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웹사이트
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http://seattletimes.[...]
2004-12-14
[10]
웹사이트
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http://virgil.ruc.dk[...]
2009-10-27
[11]
웹사이트
FREEZE TOLERANT VERTEBRATES
http://http-server.c[...]
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Cryobiology
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논문
Freeze Avoidance in a Mammal: Body Temperatures Below 0°C in an Arctic Hibernator
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2008-11-23
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Revival of spermatozoa Effective vitrification and dehydration at low temperatures
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논문
The influence of temperature-induced phase changes on the kinetics of respiratory and other membrane-associated enzyme systems
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논문
Preservation solutions for transplantation
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The role of intracellular freezing in the death of cells cooled at supraoptimal rates
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Cryopreservation of umbilical cord blood: 1. Osmotically inactive volume, hydraulic conductivity and permeability of CD34(+) cells to dimethyl sulphoxide
[19]
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Freezing
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Pacific Fertility Center
2010-02-28
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Livebirth after orthotopic transplantation of cryopreserved ovarian tissue
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J Donnez, M M Dolmans, D Demylle, P Jadoul, C Pirard, J Squifflet, B Martinez-Madrid, A Van Langendonckt
2015-01-02
[21]
뉴스
Cold War: The Conflict Between Cryonicists and Cryobiologists
http://www.alcor.org[...]
Alcor Life Extension Foundation
2009-08-24
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Officers & Governors
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Society for Cryobiology
2010-03-13
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[24]
웹사이트
Problems of Cryobiology and Cryomedicine
https://cryo.org.ua/[...]
2022-05-28
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