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연층

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목차

1. 개요

연층은 혈액을 원심분리하여 분리된 층 중 하나로, 혈장과 적혈구 층 사이에 위치하며 백혈구와 혈소판을 포함한다. DNA 추출에 사용되며, 포유류 혈액에서 DNA를 추출하는 주요 공급원이 된다. 또한, 정량적 연층(QBC) 검사를 통해 말라리아 기생충 및 기타 혈액 기생충을 검출하는 데 활용되며, 백혈구 수가 적은 경우 혈액 도말 검사를 위한 시료로 사용되기도 한다.

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연층
개요
원심분리 후 혈액의 구성 성분. 연층은 적혈구와 혈장 사이에 위치함.
원심분리 후 혈액의 구성 성분. 연층은 적혈구와 혈장 사이에 위치함.
설명혈액 샘플을 원심분리한 후 나타나는 구성 성분
구성백혈구와 혈소판이 농축된 층
위치적혈구와 혈장 사이

2. 설명

혈액을 원심분리하면 혈장, 적혈구, 백혈구, 혈소판 등으로 구성된 층으로 나뉜다. 일부는 피콜 밀도 구배로 세포를 분리할 때 연층을 참조한다.[18][19]

2. 1. 구성

혈액을 원심분리하면 투명한 액체층인 혈장, 대부분의 적혈구를 포함하는 붉은 액체층, 그리고 그 사이의 얇은 층으로 구별할 수 있다. 혈액 샘플 총 부피의 1% 미만을 구성하는 연층(보통 색상이 담황색)에는 대부분의 백혈구와 혈소판이 포함된다.[13][14] 연층은 일반적으로 희끄무레하지만, 혈액 샘플에 녹색 골수세포형과산화효소가 높은 호중구가 많이 포함되어 있는 경우 때때로 녹색을 띈다. 연층 아래 층에는 과립구와 적혈구가 포함된다.

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연층은 일반적으로 DNA 추출에 사용되며,[4] 백혈구는 약 10배 더 농축된 유핵 세포의 공급원을 제공한다.[5][15][16] 포유류의 적혈구는 세포 핵이 없고 DNA를 포함하지 않기 때문에 포유류의 혈액에서 추출된다. 일반적인 프로토콜은 향후 DNA 분리를 위해 연층 표본을 보관하는 것이며, 수년 동안 냉동 보관될 수 있다.[6][17]

일부는 피콜 밀도 구배로 세포를 분리할 때 연층을 참조한다.[18][19]

2. 2. DNA 추출

연층은 백혈구가 농축되어 있어 DNA 추출에 유용하게 사용된다.[15][16] 포유류의 적혈구는 핵이 없고 DNA를 포함하지 않으므로, 연층은 포유류 혈액에서 DNA를 추출하는 주요 공급원이 된다. 일반적인 방법은 DNA 분리를 위해 연층 표본을 냉동 보관하는 것이며, 수년 동안 보관 가능하다.[17]

3. 진단 용도

연층은 혈액 관련 질병 진단에 활용된다. 혈액 성분의 원심 층화를 기반으로 하는 정량적 연층(QBC) 검사는 말라리아 기생충 및 기타 혈액 기생충 검출에 사용되는 실험 방법이다.[20]

3. 1. 정량적 연층 (QBC) 검사

아크리딘 오렌지(형광 염료)로 코팅된 QBC 모세관에 혈액을 채취하여 원심분리한다. 형광성 기생 적혈구는 적혈구와 연층 사이의 경계면에서 자외선 형광현미경으로 관찰할 수 있는 층에 집중된다.[20] 이 검사는 기존의 혈액 도말 검사보다 더 민감하며 사례의 90% 이상에서 기생충 종도 식별할 수 있다.[21][22]

백혈구 수가 극도로 낮은 경우 다양한 유형의 백혈구를 수동으로 감별하는 것이 어려울 수 있으며 자동 감별을 얻는 것이 사실상 불가능할 수 있다. 이러한 경우 임상병리사는 혈액 도말을 만드는 연층을 얻을 수 있는데, 이 도말 검사에는 전혈보다 훨씬 더 많은 수의 백혈구가 포함되어 있다.[23]

3. 2. 백혈구 감별

백혈구 수가 극도로 낮은 경우, 다양한 유형의 백혈구를 수동으로 감별하기 어렵고 자동 감별은 사실상 불가능할 수 있다. 이러한 경우 임상병리사는 혈액 도말을 만들기 위해 연층을 얻을 수 있다. 이 도말 검사에는 전혈보다 훨씬 더 많은 수의 백혈구가 포함되어 있다.[23]

참조

[1] 간행물 CHAPTER 24 - Collection and processing of marrow and blood hematopoietic stem cells https://www.scienced[...] Churchill Livingstone 2022-08-09
[2] 서적 Junqueira's Basic Histology: Text and Atlas McGraw-Hill Education 2018
[3] 서적 Human Anatomy & Physiology https://archive.org/[...] Pearson Benjamin Cummings
[4] 논문 Buffy coat specimens remain viable as a DNA source for highly multiplexed genome-wide genetic tests after long term storage 2011-06-10
[5] 논문 High DNA stability in white blood cells and buffy coat lysates stored at ambient temperature under anoxic and anhydrous atmosphere 2017-11-30
[6] 논문 Parameters affecting the yield of DNA from human blood https://www.scienced[...] 1987-09-01
[7] 논문 Quantitative Buffy Coat Analysis-An Effective Tool for Diagnosing Blood Parasites 2014
[8] 서적 Medical Parasitology EDTECH 2018
[9] 논문 A preliminary comparative report of quantitative buffy coat and modified quantitative buffy coat with peripheral blood smear in malaria diagnosis 2012-10
[10] 서적 The White Blood Cell and Differential Count https://www.ncbi.nlm[...] Butterworths
[11] 인용 Churchill Livingstone
[12] 웹인용 Protocol for PBMC isolation from buffy coat samples https://www.reprocel[...] 2022-08-09
[13] 서적 Junqueira's Basic Histology: Text and Atlas https://archive.org/[...] McGraw-Hill Education 2018
[14] 서적 Human Anatomy & Physiology https://archive.org/[...] Pearson Benjamin Cummings
[15] 저널 인용 Buffy coat specimens remain viable as a DNA source for highly multiplexed genome-wide genetic tests after long term storage 2011-06-10
[16] 저널 인용 High DNA stability in white blood cells and buffy coat lysates stored at ambient temperature under anoxic and anhydrous atmosphere 2017-11-30
[17] 저널 인용 Parameters affecting the yield of DNA from human blood https://www.scienced[...] 1987-09-01
[18] 웹인용 Buffy Coat Isolation for Manual Ficoll Methods 0001 https://www.youtube.[...]
[19] 웹인용 What is Buffy Coat in Blood? Buffy Coat Preparation and Buffy Coat Cell Extraction https://www.akadeum.[...] 2022-08-09
[20] 저널 인용 Quantitative Buffy Coat Analysis-An Effective Tool for Diagnosing Blood Parasites 2014
[21] 서적 Medical Parasitology EDTECH 2018
[22] 저널 인용 A preliminary comparative report of quantitative buffy coat and modified quantitative buffy coat with peripheral blood smear in malaria diagnosis 2012-10
[23] 서적 Clinical Methods: The History, Physical, and Laboratory Examinations https://www.ncbi.nlm[...] Butterworths


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