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김사 염색

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목차

1. 개요

김사 염색은 DNA의 인산기에 특이적으로 결합하는 염색법으로, 주로 염색체 연구, 혈액 도말 검사, 그리고 특정 미생물 및 세포의 식별에 사용된다. G 밴딩(김사 밴딩)을 통해 염색체를 염색하여 핵형 분석 및 염색체 이상을 진단하며, 라이트 염색과 결합하여 감별 염색에도 활용된다. 혈액 도말 검사에서는 혈액 세포를 염색하여 세포의 형태를 관찰하고, 말라리아 원충, 스피로헤타, 원생동물 혈액 기생충, 그리고 거대세포바이러스 감염 등을 진단하는 데에도 사용된다. 염색 과정은 메탄올로 표본을 고정하고 김사 염색 용액으로 염색한 후 세척 및 건조하는 방식으로 진행된다.

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김사 염색
염색 정보
이름김자 염색
다른 이름귐자 염색
명명 유래구스타프 김자
용도조직병리학 (조직 및 혈액 세포 염색)
염색 부위핵, 세포질, 과립, 기생충
염색 결과핵과 세포질: 보라색
적혈구: 분홍색
과립: 푸른색
말라리아 원충: 특징적인 색상
염색 원리
염색 메커니즘Romanowsky-Giemsa 효과
염료 성분아즈르 (Azure) 염료
에오신 (Eosin) 염료
용매글리세롤, 메탄올
사용 방법
염색 방법현미경 슬라이드에 도말된 혈액 또는 조직 샘플을 염색
염색 과정


의료 분야 활용
진단말라리아 진단 (혈액 내 말라리아 원충 관찰)
혈액 질환 진단 (혈액 세포 형태 관찰)
세균 감염 진단 (세균 관찰)
기타세포 유전학 연구

2. 용도

김사 염색은 혈액학적 검사, 세포유전학적 검사, 미생물학적 검사 등 다양한 분야에서 활용되는 염색법이다.

2. 1. 혈액학적 검사

김사 염색은 말초 혈액 도말이나 골수 표본에 대한 고전적인 혈액 도말 염색법이다. 이 염색법을 사용하면 적혈구는 분홍색, 혈소판은 옅은 분홍색, 림프구의 세포질은 하늘색, 단핵구의 세포질은 옅은 파란색, 백혈구 핵 염색질은 마젠타색으로 염색된다. 또한 김사 염색은 페스트균의 특징적인 모양을 잘 보여주는 데에도 사용된다.[14]

2. 2. 세포유전학적 검사

DNA의 인산기에 특이적이며 아데닌-티민 결합이 많은 DNA 영역에 붙는다. 김사 염색은 일반적으로 G 밴딩(김사 밴딩)에 사용되어 염색체를 염색하고 종종 핵형도(염색체 지도)를 만드는 데 사용된다. 전좌나 재배열과 같은 염색체 이상을 식별할 수 있다.[14]

핵형 분석을 위해 김사 염색을 사용한 인간 남성 염색체

2. 3. 미생물학적 검사

김사 염색은 감별염색의 일종으로, 다양한 미생물과 세포를 구별하여 염색하는 데 사용된다.

  • 세균 염색:
  • 인간 세포에 병원성 세균이 부착되는 것을 연구하는 데 사용될 수 있다. 인간 세포는 보라색, 세균 세포는 분홍색으로 염색된다.
  • 페스트균의 특징적인 "안전핀" 모양을 관찰하는 데 사용된다.
  • 클라미디아를 염색할 수 있다.[16]
  • 기생충 염색:
  • 말라리아의 원인 병원체인 열원충을 비롯한 스피로헤타, 원생동물 혈액 기생충의 조직병리학적 진단에 사용될 수 있다.[14]
  • 질편모충 영양체를 염색하여 운동성 세포를 관찰할 수 있다.
  • 바이러스 염색:
  • 염색체를 관찰하는 데 사용되며, 특히 거대세포바이러스 감염의 특징적인 "올빼미 눈 징후" 바이러스 봉입체를 확인하는 데 유용하다.[15]
  • 진균 염색:
  • 진균인 히스토플라스마를 염색할 수 있다.[16]
  • 기타:
  • 비만 세포를 식별하는 데 사용될 수 있다.[16]
  • 말초 혈액 도말이나 골수 표본 검사 시, 적혈구(분홍색), 혈소판(옅은 분홍색), 림프구 세포질(하늘색), 단핵구 세포질(옅은 파란색), 백혈구 핵 염색질(마젠타색) 등 다양한 세포 성분을 구별하여 염색한다.

거대세포바이러스 감염과 관련되어 올빼미 눈 징후를 보이는 바이러스 봉입체.

2. 4. 기타 용도

김사 염색은 감별염색을 위해 사용될 수 있다. 라이트 염색과 결합하여 라이트-김사 염색을 형성하는데, 이는 인간 세포에 병원성 세균이 부착되는 것을 연구하는 데 사용될 수 있다. 인간 세포와 세균 세포를 각각 보라색과 분홍색으로 구별하여 염색한다. 말라리아의 원인 병원체인 플라스모디움,[14] 기타 스피로헤타나 원생동물 혈액 기생충의 조직병리학적 진단에 사용될 수 있다.

김사 염색은 말초 혈액 도말이나 골수 표본에 대한 고전적인 혈액 도말 염색법이다. 적혈구는 분홍색으로, 혈소판은 옅은 분홍색으로, 림프구의 세포질은 하늘색으로, 단핵구의 세포질은 옅은 파란색으로, 백혈구 핵 염색질은 마젠타색으로 염색된다. 또한 페스트균의 모양을 잘 보이게 하는 데 사용된다.

염색체를 보이게 하는 데에도 사용된다. 이것은 특히 '올빼미 눈' 바이러스 봉입체라는 거대세포바이러스 감염의 검출에 사용되는 고전적인 징후와 관련이 있다.[15]

김사 염색은 진균인 히스토플라스마나 세균인 클라미디아를 염색하고 비만 세포를 식별하는 데 사용할 수 있다.[16]

3. 염색 과정

김사 염색 과정은 다음과 같다.

1. 현미경 슬라이드 위의 검체 박막을 순수 메탄올에 30초 동안 담그거나 슬라이드에 메탄올 몇 방울을 떨어뜨려 고정한다.

2. 슬라이드를 새로 제조한 5% 김사 염색액 용액에 20~30분 동안 담근다.

3. 긴급한 경우에는 10% 용액에서 5~10분 동안 염색할 수 있다.

4. 수돗물로 헹군 후 건조시킨다.[17][6][12]

3. 1. 시약 준비

김사 염색액은 메틸렌 블루, 에오신, [http://www.chemicalland21.com/specialtychem/finechem/AZURE%20B.htm Azure B]의 혼합물이다. 염색은 일반적으로 시판되는 김사 분말로 준비된다.[17]

현미경 슬라이드에 있는 표본의 박막을 순수한 메탄올에 30초 동안 담그거나 슬라이드에 메탄올 몇 방울을 떨어뜨려 고정시킨다. 슬라이드를 새로 준비된 5% 김사 염색 용액에 20-30분 동안 담근 다음(긴급 상황에서는 10% 용액에 5-10분 사용 가능), 수돗물로 씻어내고 건조시킨다.[17]

3. 2. 검체 고정

현미경 슬라이드에 있는 표본의 박막을 순수한 메탄올에 30초 동안 담그거나 슬라이드에 메탄올 몇 방울을 떨어뜨려 고정한다.[17] 그 후 슬라이드를 새로 준비된 5% 김사 염색 용액에 20-30분 동안 담근다. 긴급 상황에서는 10% 용액에 5-10분 동안 담가 사용할 수 있다. 마지막으로 수돗물로 씻어내고 건조시킨다.[17]

3. 3. 염색

김사 염색 용액은 메틸렌 블루, 에오신, [http://www.chemicalland21.com/specialtychem/finechem/AZURE%20B.htm 아쥬르 B]의 혼합물이다. 염색은 일반적으로 시판되는 김사 분말로 준비된다.[17]

현미경 슬라이드에 있는 표본의 박막을 순수한 메탄올에 30초 동안 담그거나 슬라이드에 메탄올 몇 방울을 떨어뜨려 고정시킨다. 슬라이드를 새로 준비된 5% 김사 염색 용액에 20-30분 동안 담근 다음(긴급 상황에서는 10% 용액에 5-10분 사용 가능), 수돗물로 씻어내고 건조시킨다.[6],[12]

3. 4. 세척 및 건조

현미경 슬라이드에 있는 표본의 박막을 순수한 메탄올에 30초 동안 담그거나 슬라이드에 메탄올 몇 방울을 떨어뜨려 고정한다. 슬라이드를 새로 준비된 5% 김사 염색 용액에 20~30분 동안 담근다. 긴급 상황에서는 10% 용액에 5~10분 동안 담가둘 수 있다. 그 후 수돗물로 씻어내고 건조시킨다.[17][6][12]

참조

[1] 논문 Über Romanowsky-Farbstoffe und den Romanowsky-Giemsa-Effekt 1984
[2] 논문 Cytometry in malaria: moving beyond Giemsa 2007-08
[3] 서적 The Prokaryotes Springer
[4] 논문 Detection of infection or infectious agents by use of cytologic and histologic stains 1996-07
[5] 논문 Mast cells and atopic dermatitis. Stereological quantification of mast cells in atopic dermatitis and normal human skin https://link.springe[...] 1997-04
[6] 웹사이트 4.2.2.2. Giemsa stain http://en.impact-mal[...] 2013-10-28
[7] 논문 Über Romanowsky-Farbstoffe und den Romanowsky-Giemsa-Effekt https://doi.org/10.1[...] 1984
[8] 간행물 Giemsa G (1904 Eine Vereinfachung und Vervollkommnung meiner Methylenblau-Eosin-Färbemethode zur Erzielung der Romanowsky-Nocht’schen Chromatinfärbung. Centralblatt für Bakteriologie I Abteilung 32, 307-313.
[9] 논문 Cytometry in malaria: moving beyond Giemsa 2007-09
[10] 논문 Detection of infection or infectious agents by use of cytologic and histologic stains 1996-07
[11] 논문 Mast cells and atopic dermatitis. Stereological quantification of mast cells in atopic dermatitis and normal human skin 1997-04
[12] 웹사이트 4.2.2.2. Giemsa stain 2013-10-28
[13] 간행물 Giemsa G (1904 Eine Vereinfachung und Vervollkommnung meiner Methylenblau-Eosin-Färbemethode zur Erzielung der Romanowsky-Nocht’schen Chromatinfärbung. Centralblatt für Bakteriologie I Abteilung 32, 307–313.
[14] 저널 인용 Cytometry in malaria: moving beyond Giemsa 2007-09
[15] 저널 인용 Detection of infection or infectious agents by use of cytologic and histologic stains 1996-07
[16] 저널 인용 Mast cells and atopic dermatitis. Stereological quantification of mast cells in atopic dermatitis and normal human skin http://link.springer[...] 1997-04
[17] 웹인용 4.2.2.2. Giemsa stain http://en.impact-mal[...] 2013-10-28


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