최소 필수 배지
1. 개요
최소 필수 배지(MEM)는 세포 배양에 사용되는 합성 배지 중 하나로, 세포 생존에 필요한 다양한 성분을 제공한다. MEM은 아미노산, 비타민, 무기염류, 포도당 등을 포함하며, 세포의 종류와 배양 조건에 따라 다른 종류의 배지를 사용한다. MEM, BME, MEMa, DMEM 등이 있으며, 각 배지 종류는 구성 성분의 함량에 차이가 있다.
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| 종류 | 세포 배양 배지 |
|---|---|
| 개발자 | 해리 이글 |
| 개발 연도 | 1959년 |
| 용도 | 다양한 포유류 세포 배양 |
| 기본 구성 성분 | 필수 아미노산 비타민 염 포도당 |
| 추가 성분 | 혈청 (일반적으로 FBS) 항생제 |
| 종류 | α-MEM DMEM GMEM |
|---|
| 개발 배경 | 1955년, 해리 이글은 L 세포와 헬라 세포 배양에 필요한 특정 아미노산을 밝힘. 이를 바탕으로 더 간단한 배지 개발을 시도. |
|---|---|
| 개발 과정 | 기존 배지(기초 필수 배지)에 특정 영양소를 추가하여 세포 생존율과 성장률을 향상시킴. 혈청 단백질 함량을 줄이기 위해 배지 조성 최적화. |
| 초기 사용 | 폴리오바이러스 연구에 활용 |
| 참고 자료 | [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] |
|---|
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3D 세포 배양
3D 세포 배양은 세포의 생체 내 환경을 모방하여 조직의 구조와 기능을 재현하는 기술로, 약리학 및 독성학 연구, 고속 대량 스크리닝 등에 활용되지만, 프로토콜 표준화 등의 과제를 안고 있다. -
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2. 구성 성분
최소 필수 배지(MEM)는 아미노산, 비타민, 무기염류, 포도당 등 세포 배양에 필요한 다양한 성분으로 구성된다. 이러한 구성 성분들은 세포의 성장과 생존에 필수적인 역할을 한다. MEM에는 페놀 레드(pH 변화를 시각적으로 확인), 피루브산 나트륨(세포의 에너지 생성), 리포산(세포를 산화 스트레스로부터 보호) 등도 포함되어 있다.
2.1. 아미노산
| 아미노산 | BME | MEM | α-MEM | DMEM |
|---|---|---|---|---|
| 글라이신 | 50 | 30 | ||
| L-알라닌 | 25 | |||
| L-아르기닌 염산염 | 21 | 126 | 126 | 84 |
| L-아스파라진-H2O | 50 | |||
| L-아스파르트산 | 30 | |||
| L-시스테인 염산염-H2O | 100 | |||
| L-시스틴 2HCl | 16 | 31 | 31 | 63 |
| L-글루탐산 | 75 | |||
| L-글루타민 | 292 | 292 | 292 | 584 |
| L-히스티딘 | 8 | 31 | 42 | |
| L-히스티딘 염산염-H2O | 42 | 42 | ||
| L-아이소류신 | 26 | 52 | 52 | 105 |
| L-류신 | 26 | 52 | 52 | 105 |
| L-라이신 염산염 | 36.47 | 73 | 73 | 146 |
| L-메사이오닌 | 7.5 | 15 | 15 | 30 |
| L-페닐알라닌 | 16.5 | 32 | 32 | 66 |
| L-프롤린 | 40 | |||
| L-세린 | 25 | 42 | ||
| L-트레오닌 | 24 | 48 | 48 | 95 |
| L-트립토판 | 4 | 10 | 10 | 16 |
| L-타이로신 이나트륨 이수화물 | 26 | 52 | 52 | 104 |
| L-발린 | 23.5 | 46 | 46 | 94 |
2.2. 비타민
2.3. 무기염류
염화 칼슘(CaCl2), 황산 마그네슘(MgSO4), 염화 포타슘(KCl), 탄산수소 나트륨(NaHCO3), 염화 나트륨(NaCl), 인산 일수소 나트륨(NaH2PO4-H2O)은 최소 필수 배지(MEM)를 구성하는 주요 무기염류이다. 각 배지 1리터에 포함된 무기염류의 양(mg)은 다음과 같다.
| 성분 | BME | MEM | MEMa | DMEM |
|---|---|---|---|---|
| 염화 칼슘 (CaCl2) | 200 | 200 | 200 | 200 |
| 황산 마그네슘 (MgSO4) | 97.67 | 97.67 | 97.67 | 97.67 |
| 염화 포타슘 (KCl) | 400 | 400 | 400 | 400 |
| 탄산 수소 나트륨 (NaHCO3) | 2200 | 2200 | 2200 | 3700 |
| 염화 나트륨 (NaCl) | 6800 | 6800 | 6800 | 6400 |
| 인산 일수소 나트륨 (NaH2PO4-H2O) | 140 | 140 | 140 | 125 |
2.5. 기타 성분
Phenol Red영어는 pH 변화를 시각적으로 확인하기 위한 지시약으로 사용된다. Sodium pyruvate영어은 해당 과정의 중간 대사 산물로, 세포의 에너지 생성에 도움을 줄 수 있다. Lipoic acid영어은 항산화 작용을 하는 조효소로, 세포를 산화 스트레스로부터 보호하는 역할을 한다.
2.6. 배지 구성표
| 성분 | BME | MEM | α-MEM | DMEM |
|---|---|---|---|---|
| 글라이신 | 50 | 30 | ||
| L-알라닌 | 25 | |||
| L-아르기닌 염산염 | 21 | 126 | 126 | 84 |
| L-아스파라진-H2O | 50 | |||
| L-아스파르트산 | 30 | |||
| L-시스테인 염산염-H2O | 100 | |||
| L-시스테인 2HCl | 16 | 31 | 31 | 63 |
| L-글루탐산 | 75 | |||
| L-글루타민 | 292 | 292 | 292 | 584 |
| L-히스티딘 | 8 | 31 | 42 | |
| L-히스티딘 염산염-H2O | 42 | 42 | ||
| L-아이소류신 | 26 | 52 | 52 | 105 |
| L-류신 | 26 | 52 | 52 | 105 |
| L-라이신 염산염 | 36.47 | 73 | 73 | 146 |
| L-메티오닌 | 7.5 | 15 | 15 | 30 |
| L-페닐알라닌 | 16.5 | 32 | 32 | 66 |
| L-프롤린 | 40 | |||
| L-세린 | 25 | 42 | ||
| L-트레오닌 | 24 | 48 | 48 | 95 |
| L-트립토판 | 4 | 10 | 10 | 16 |
| L-타이로신 이나트륨 이수화물 | 26 | 52 | 52 | 104 |
| L-발린 | 23.5 | 46 | 46 | 94 |
| 아스코르브산 | 50 | |||
| 비오틴 | 1 | 0.1 | ||
| 염화콜린 | 1 | 1 | 1 | 4 |
| D-판토텐산 칼슘 | 1 | 1 | 1 | 4 |
| 엽산 | 1 | 1 | 1 | 4 |
| 나이아신아마이드 | 1 | 1 | 1 | 4 |
| 피리독살 염산염 | 1 | 1 | 1 | 4 |
| 리보플라빈 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.4 |
| 티아민 염산염 | 1 | 1 | 1 | 4 |
| 비타민 B12 | 1.36 | |||
| i-이노시톨 | 2 | 2 | 2 | 7.2 |
| 염화 칼슘 (CaCl2, 무수.) | 200 | 200 | 200 | 200 |
| 질산 제이철 (Fe(NO3)3·9H2O) | 0.1 | |||
| 황산 마그네슘 (MgSO4, 무수.) | 97.67 | 97.67 | 97.67 | 97.67 |
| 염화 포타슘 (KCl) | 400 | 400 | 400 | 400 |
| 탄산수소나트륨 (NaHCO3) | 2200 | 2200 | 2200 | 3700 |
| 염화 나트륨 (NaCl) | 6800 | 6800 | 6800 | 6400 |
| 인산 일수소 나트륨 (NaH2PO4-H2O) | 140 | 140 | 140 | 125 |
| D-포도당 (덱스트로스) | 1000 | 1000 | 1000 | 4500 |
| 리포산 | 0.2 | |||
| 페놀 레드 | 10 | 10 | 10 | 15 |
| 피루브산 나트륨 | 110 | 110 |
3. 주요 배지 종류
세포 배양에 사용되는 최소 필수 배지에는 다음과 같은 종류가 있다.
* [[BME (배지)|BME]] (Basal Medium Eagle): 가장 기본적인 배지 중 하나이다.
* [[MEM (배지)|MEM]] (Minimum Essential Medium): BME보다 아미노산, 비타민 등의 농도가 더 높으며, 다양한 포유류 세포 배양에 사용된다.
* MEMα (Minimum Essential Medium alpha): MEM의 변형된 형태이다.
* [[DMEM (배지)|DMEM]] (Dulbecco's Modified Eagle's Medium): BME에서 아미노산과 비타민 농도를 4배, 포도당 농도를 최대 4배까지 높인 배지이다.
* [[RPMI 1640]] (Roswell Park Memorial Institute medium): 림프 세포 배양에 사용된다.
각 배지에 대한 자세한 성분 조성은 하위 섹션에 표로 정리되어 있다.
3.1. BME (Basal Medium Eagle)
BME(Basal Medium Eagle)는 최소 필수 배지 중 하나로, 각 배지 1리터에 포함된 성분은 아래 표와 같다.
| 성분 | 양 (mg) |
|---|---|
| L-아르기닌 염산염 (L-Arginine hydrochloride) | 21 |
| L-시스테인 2HCl (L-Cysteine 2HCl) | 16 |
| L-글루타민 (L-Glutamine) | 292 |
| L-히스티딘 (L-Histidine) | 8 |
| L-아이소류신 (L-Isoleucine) | 26 |
| L-류신 (L-Leucine) | 26 |
| L-라이신 염산염 (L-Lysine Hydrochloride) | 36.47 |
| L-메사이오닌 (L-Methionine) | 7.5 |
| L-페닐알라닌 (L-Phenylalanine) | 16.5 |
| L-트레오닌 (L-Threonine) | 24 |
| L-트립토판 (L-Tryptophan) | 4 |
| L-타이로신 다이나트륨염 이수화물 (Tyrosine Disodium Salt Dihydrate) | 26 |
| L-발린 (L-Valine) | 23.5 |
| 비오틴 (Biotin) | 1 |
| 염화콜린 (Choline Chloride) | 1 |
| D-칼슘 판토텐산염 (D-Calcium pantothenate) | 1 |
| 엽산 (Folic Acid) | 1 |
| 나이아신 아마이드 (Niacinamide) | 1 |
| 피리독살 수화염화물 (Pyridoxal hydrochloride) | 1 |
| 리보플라빈 (Riboflavin) | 0.1 |
| 염산치아민 (Thiamine hydrochloride) | 1 |
| i-이노시톨 (i-Inositol) | 2 |
| 염화 칼슘 (Calcium Chloride, CaCl2) | 200 |
| 황산 마그네슘 (Magnesium Sulfate, MgSO4) | 97.67 |
| 염화 포타슘 (Potassium Chloride, KCl) | 400 |
| 탄산수소 나트륨 (Sodium Bicarbonate, NaHCO3) | 2200 |
| 염화 나트륨 (Sodium Chloride, NaCl) | 6800 |
| Sodium Phosphate monobasic (NaH2PO4-H2O) | 140 |
| D-포도당(덱스트로스) (D-Glucose, Dextrose) | 1000 |
| 페놀 레드 (Phenol Red) | 10 |
3.2. MEM (Minimum Essential Medium)
MEM(Minimum Essential Medium)은 BME와 유사하지만, 아미노산, 비타민 등의 농도가 더 높다. MEM은 다양한 포유류 세포 배양에 사용된다.
각 배지 1리터에 포함된 성분은 다음과 같다 (단위: mg).
| 성분 | BME | MEM | MEMα |
|---|---|---|---|
| 글라이신 | 50 | ||
| L-알라닌 | 25 | ||
| L-아르기닌 염산염 | 21 | 126 | 126 |
| L-아스파라진-H2O | 50 | ||
| L-아스파르트산 | 30 | ||
| L-시스테인 염산염-H2O | 100 | ||
| L-시스테인 2HCl | 16 | 31 | 31 |
| L-글루탐산 | 75 | ||
| L-글루타민 | 292 | 292 | 292 |
| L-히스티딘 | 8 | 31 | |
| L-히스티딘 염산염-H2O | 42 | 42 | |
| L-아이소류신 | 26 | 52 | 52 |
| L-류신 | 26 | 52 | 52 |
| L-라이신 염산염 | 36.47 | 73 | 73 |
| L-메사이오닌 | 7.5 | 15 | 15 |
| L-페닐알라닌 | 16.5 | 32 | 32 |
| L-프롤린 | 40 | ||
| L-세린 | 25 | ||
| L-트레오닌 | 24 | 48 | 48 |
| L-트립토판 | 4 | 10 | 10 |
| L-타이로신 다이나트륨염 이수화물 | 26 | 52 | 52 |
| L-발린 | 23.5 | 46 | 46 |
| 아스코르브산 | 50 | ||
| 비오틴 | 1 | 0.1 | |
| 염화콜린 | 1 | 1 | 1 |
| D-칼슘 판토텐산염 | 1 | 1 | 1 |
| 엽산 | 1 | 1 | 1 |
| 나이아신 아마이드 | 1 | 1 | 1 |
| 피리독살 수화염화물 | 1 | 1 | 1 |
| 리보플라빈 | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
| 티아민 염산염 | 1 | 1 | 1 |
| 비타민 B12 | 1.36 | ||
| i-이노시톨 | 2 | 2 | 2 |
| 염화 칼슘 | 200 | 200 | 200 |
| 황산 마그네슘 | 97.67 | 97.67 | 97.67 |
| 염화 포타슘 | 400 | 400 | 400 |
| 탄산수소나트륨 | 2200 | 2200 | 2200 |
| 염화 나트륨 | 6800 | 6800 | 6800 |
| 인산 나트륨 일염기 (NaH2PO4-H2O) | 140 | 140 | 140 |
| D-포도당 (덱스트로스) | 1000 | 1000 | 1000 |
| 리포산 | 0.2 | ||
| 페놀 레드 | 10 | 10 | 10 |
| 피루브산 소듐 | 110 |
3.3. MEMa (Minimum Essential Medium alpha)
MEMa (Minimum Essential Medium alpha)는 세포 배양에 사용되는 배지의 한 종류이다. MEMa 배지 1리터에 포함된 성분과 양 (mg)은 아래 표와 같다.
| 성분 | 양 (mg) |
|---|---|
| 글라이신 (Glycine) | 50 |
| L-알라닌 (L-Alanine) | 25 |
| L-아르기닌 염산염 (L-Arginine hydrochloride) | 126 |
| L-아스파라진-H2O (L-Asparagine-H2O) | 50 |
| L-아스파르트산 (L-Aspartic acid) | 30 |
| L-시스테인 염산염-H2O (L-Cysteine Hydrochloride-H2O) | 100 |
| L-시스테인 2HCl (L-Cysteine 2HCl) | 31 |
| L-글루탐산 (L-Glutamate) | 75 |
| L-글루타민 (L-Glutamine) | 292 |
| L-히스티딘 (L-Histidine) | 31 |
| L-히스티딘 염산염-H2O (L-Histidine-H2O) | 42 |
| L-아이소류신 (L-Isoleucine) | 52 |
| L-류신 (L-Leucine) | 52 |
| L-라이신 염산염 (L-Lysine Hydrochloride) | 73 |
| L-메사이오닌 (L-Methionine) | 15 |
| L-페닐알라닌 (L-Phenylalanine) | 32 |
| L-프롤린 (L-Proline) | 40 |
| L-세린 (L-Serine) | 25 |
| L-트레오닌 (L-Threonine) | 48 |
| L-트립토판 (L-Tryptophan) | 10 |
| L-타이로신 다이나트륨염 이수화물 (Tyrosine Disodium Salt Dihydrate) | 52 |
| L-발린 (L-Valine) | 46 |
| 아스코르브산 (Ascorbic Acid) | 50 |
| 비오틴 (Biotin) | 0.1 |
| 염화콜린 (Choline Chloride) | 1 |
| D-칼슘 판토텐산염 (D-Calcium pantothenate) | 1 |
| 엽산 (Folic Acid) | 1 |
| 나이아신 아마이드 (Niacinamide) | 1 |
| 피리독살 수화염화물 (Pyridoxal hydrochloride) | 1 |
| 리보플라빈 (Riboflavin) | 0.1 |
| 염산치아민 (Thiamine hydrochloride) | 1 |
| 비타민 B12 (Vitamin B12) | 1.36 |
| i-이노시톨 (i-Inositol) | 2 |
| 염화 칼슘 (Calcium Chloride, CaCl2) | 200 |
| 황산 마그네슘 (Magnesium Sulfate, MgSO4) | 97.67 |
| 염화 포타슘 (Potassium Chloride, KCl) | 400 |
| 탄산수소 나트륨 (Sodium Bicarbonate, NaHCO3) | 2200 |
| 염화 나트륨 (Sodium Chloride, NaCl) | 6800 |
| Sodium Phosphate monobasic (NaH2PO4-H2O) | 140 |
| D-포도당(덱스트로스) (D-Glucose, Dextrose) | 1000 |
| 리포산 (Lipoic Acid) | 0.2 |
| 페놀 레드 (Phenol Red) | 10 |
| 피루브산 소듐 (Sodium Pyruvate) | 110 |
3.4. DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium)
DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)은 BME 배지에서 아미노산과 비타민 농도를 4배, 포도당 농도를 최대 4배까지 높인 배지이다. DMEM은 원래 포도당 농도가 낮고(1g/L) 피루브산 나트륨이 없지만, 종종 피루브산 나트륨을 첨가하여 제조되기도 한다.
각 배지 리터당 (밀리그램) 성분은 다음과 같다.
3.5. RPMI 1640 (Roswell Park Memorial Institute medium)
RPMI 1640은 Roswell Park Memorial Institute 배지의 약자이며, 림프 세포용 배지이다.
4. 대한민국의 세포 배양 연구 현황 및 과제
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