조직학
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1. 개요
조직학은 생물체의 조직을 현미경으로 연구하는 학문 분야이다. 조직은 크게 근육 조직, 신경 조직, 결합 조직, 상피 조직의 4가지 기본 유형으로 분류되며, 동물, 식물, 미생물 등 다양한 생명체의 조직을 연구한다. 조직학 연구는 시료 준비, 염색, 현미경 관찰 등의 다양한 방법을 통해 이루어지며, 특히 현미경 관찰을 위한 시료 제작 과정이 중요하다. 조직병리학은 질병에 걸린 조직을 연구하는 조직학의 한 분야로, 암을 비롯한 여러 질병의 정확한 진단에 활용된다. 최근에는 MRI를 이용한 체외 조직학 기술 개발에 대한 관심이 높아지고 있다.
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조직학 | |
---|---|
개요 | |
학문 분야 | 생물학, 의학 |
정의 | 식물 및 동물의 세포와 조직의 미세한 해부학적 구조를 연구하는 학문 |
관련 학문 | 해부학, 생리학, 병리학, 세포생물학, 분자생물학, 발생학 |
연구 대상 | 세포, 조직, 기관 |
연구 방법 | 현미경 관찰, 조직 표본 제작, 염색 |
응용 분야 | 의학 연구, 질병 진단, 법의학, 생명 공학 |
역사 | |
기원 | 17세기 현미경 발명 이후 |
발전 | 19세기 조직 표본 제작 및 염색 기술 발전 |
주요 학자 | 마르첼로 말피기 카를 마이어 마리 프랑수아 자비에르 비샤 |
조직 표본 제작 | |
과정 | 채취 고정 포매 박절 염색 봉입 |
염색 방법 | 헤마톡실린-에오신 염색 (H&E 염색) PAS 염색 트리크롬 염색 면역조직화학 염색 |
세포 | |
구성 요소 | 세포막 세포질 핵 |
종류 | 상피 세포 결합 조직 세포 근육 세포 신경 세포 |
조직 | |
종류 | 상피 조직 결합 조직 근육 조직 신경 조직 |
관련 용어 | |
관련 용어 | 조직 병리학 (Histopathology) 병리 해부 (anatomical pathology) |
참고 문헌 | |
관련 서적 | 인체 해부학 (Gray's Anatomy) |
관련 직업 | |
관련 직업 | 조직 검사 기사 (histotechnicians, histology technicians (HT), histology technologists (HTL)) 의학 과학자 (medical scientists) 의료 실험 조교 (Medical Laboratory Assistant) 의료 실험 기사 (Medical Laboratory Technician) 생물 의학자 (Biomedical scientist) |
2. 조직의 분류
생물체의 조직은 크게 동물 조직과 식물 조직으로 나눌 수 있다.
동물 조직은 상피 조직, 결합 조직, 근육 조직, 신경 조직의 네 가지 기본 유형으로 분류된다.[68] 모든 동물 조직은 이 네 가지 기본 조직의 하위 유형에 해당한다. 예를 들어 혈액은 세포외 기질인 혈장에 혈액 세포가 떠다니기 때문에 결합 조직으로 분류된다.
식물 조직은 식물 해부학 분야에서 연구되며, 표피 조직, 관다발 조직, 기본 조직, 분열 조직의 네 가지 주요 유형이 있다.[69]
2. 1. 동물 조직
동물 조직은 근육 조직, 신경 조직, 결합 조직, 상피 조직의 네 가지 기본 유형으로 분류된다.[17][27] 모든 동물 조직은 이 네 가지 주요 조직 유형의 하위 유형으로 간주된다. 예를 들어, 혈액은 세포외 기질인 혈장에 혈액 세포가 부유되어 있으므로 결합 조직으로 분류된다.[27]- '''상피 조직'''
- 단층 상피
- 단층 편평 상피
- 단층 입방 상피
- 단층 원주 상피
- 거짓 중층 원주 상피
- 중층 상피
- 중층 편평 상피
- 중층 입방 상피
- 중층 원주 상피
- 이행 상피
- 다세포 샘
- '''근육 조직'''
- 민무늬근
- 골격근
- 심장근
- '''결합 조직'''
- 일반 결합 조직
- 성긴 결합 조직
- 치밀 결합 조직
- 특수 결합 조직
- 연골
- 뼈
- 조혈 조직
- 혈액
- 림프
- '''신경 조직'''
- 중추 신경계
- 말초 신경계
- 특수 수용체
2. 2. 식물 조직
식물의 경우, 조직에 대한 연구는 식물 해부학 분야에 속하며, 다음의 4가지 주요 유형이 있다.- 표피 조직
- 관다발 조직
- 기본 조직
- 분열 조직

3. 조직학 연구 방법
조직학 연구는 현미경을 통해 세포와 조직의 미세한 구조를 관찰하는 학문이다. 이를 위해 다양한 연구 방법이 사용되는데, 주로 현미경 관찰을 위한 시료 제작 과정이 중요하다.
조직 시료는 일반적으로 여러 단계를 거쳐 준비된다. 먼저, 조직을 얇게 자르기 위해 단단한 물질에 포매한다. 광학 현미경 검사에는 주로 파라핀 왁스가 사용되며, 전자 현미경 검사에는 주로 에폭시 수지가 사용된다. 포매된 조직은 마이크로톰이라는 기구를 사용하여 얇게 박절하는데, 광학 현미경 검사를 위해서는 5~15um 두께로, 투과 전자 현미경 검사를 위해서는 50~150nm 두께로 절단한다.
조직의 변성을 막고 세포 구조를 보존하기 위해 화학적 고정을 시행한다. 광학 현미경 검사에는 포르말린이나 부앙액 등이 사용되고, 전자 현미경 검사에는 글루타르알데히드가 주로 사용된다.
헤마톡실린과 에오신 (H&E 염색)은 조직의 일반적인 구조를 보여주기 위해 가장 널리 사용되는 염색 방법이다. 이 외에도 조직화학, 면역조직화학, 면역형광법 등 다양한 특수 기법들이 사용된다. 펄스 프러시안 블루 반응, 니스틀 방법, 골지 염색법, 은 염색 등이 그 예시이다.
최근에는 항체를 이용하여 단백질, 탄수화물, 지질 등을 특이적으로 시각화하는 면역조직화학 방법이 많이 사용된다. 염료가 형광 분자인 경우에는 면역형광법이라고 하며, 형광 현미경 및 공초점 현미경을 사용하여 세포 내 세부 사항을 관찰한다.
전자 현미경 검사에서는 조직 절편을 중금속으로 염색하여 대비를 높인다. 초산 우라닐과 시트르산 납이 흔히 사용된다.
냉동 절편은 조직을 빠르게 동결, 절단하여 절편을 제작하는 방법으로, 모스 수술 등에서 종양 경계를 신속하게 확인하는 데 사용된다.
초미세절단술은 투과 전자 현미경(TEM) 분석을 위해 극도로 얇은 절편을 준비하는 방법으로, 조직을 에폭시 수지에 포매한 후 다이아몬드 또는 유리 칼을 사용하여 0.1um 미만의 두께로 절단한다.
3. 1. 시료 준비
현미경 관찰을 위한 조직 시료는 일반적으로 여러 단계를 거쳐 준비된다. 이러한 과정은 시료와 관찰 방법에 따라 달라진다.먼저, 조직을 얇게 자를 수 있도록 단단한 물질에 포매한다.[27][17] 이 과정에서 조직의 수분을 제거하고(탈수), 포매 물질로 대체한다.[10]

광학 현미경 검사에는 주로 파라핀 왁스가 포매 재료로 사용된다.[10][32] 파라핀은 물과 섞이지 않기 때문에, 조직을 에탄올 용액에 담가 탈수시킨다.[10] 이후 자일렌[32]과 같은 청징제를 사용하여 알코올을 제거하고 파라핀 왁스가 조직에 침투하도록 한다.[27] 이 과정은 자동화된 조직 처리기에서 수행된다.[32] 파라핀에 침투된 조직은 틀에 넣어 굳힌다.[32][10]
파라핀 왁스는 매우 얇은 절편을 만들기에 충분히 단단하지 않을 수 있으며, 열이나 화학 물질이 조직을 손상시킬 수도 있다.[10] 따라서 에폭시, 아크릴, 한천, 젤라틴, 콜로디온 등이 사용되기도 한다.[10][16]
전자 현미경 검사에는 주로 에폭시 수지가 사용되지만,[27] 면역조직화학이 필요한 경우에는 아크릴 수지가 사용되기도 한다.
냉동 절편을 만들 때는 조직을 수성 포매 재료에 넣고 얼린다.

포매된 조직은 마이크로톰이라는 기구를 사용하여 얇게 박절한다. 광학 현미경 검사를 위해서는 마이크로톰에 장착된 칼을 사용하여 5um~15um 두께로 절단하고, 유리 현미경 슬라이드에 부착한다.[27] 투과 전자 현미경(TEM) 검사를 위해서는 울트라마이크로톰에 장착된 다이아몬드 또는 유리 칼을 사용하여 50nm~150nm 두께로 절단한다.[27]
라이카 바이오시스템즈(Leica Biosystems)는 연구 및 임상 연구에 사용되는 마이크로톰 및 관련 제품을 생산하는 주요 제조업체 중 하나이다.[2]

조직의 변성을 막고 세포 구조를 보존하기 위해 화학적 고정을 시행한다. 광학 현미경 검사에는 10% 중성 완충 포르말린(인산 완충 생리 식염수에 4%의 포름알데히드를 첨가한 것)이나 부앙액(Bouin Solution영어) 등이 사용된다.[36][37] 전자 현미경 검사에는 글루타르알데히드가 주로 사용되며, 인산 완충 생리 식염수에 2.5%의 글루타르알데히드를 첨가하여 사용한다. 이러한 고정액은 단백질 간의 비가역적인 가교 결합을 형성하여 조직을 보존한다. 포름알데히드는 메틸렌 가교 (-CH2-)를, 글루타르알데히드는 C5H10 가교를 형성한다. 고정 과정에서 세포 구조는 보존되지만, 효소와 같은 단백질은 변성될 수 있다. 전자 현미경 검사에서는 사산화 오스뮴이나 육우라닐 아세테이트와 같은 추가적인 고정이 수행될 수 있다.
포르말린 고정은 조직 내 mRNA, miRNA, DNA를 열화시키지만, 적절한 방법을 통해 포르말린 고정 및 파라핀 포매된 조직에서 핵산을 추출하고 분석할 수 있다.[38]
조직 처리의 주요 목적은 조직에서 수분을 제거하고, 얇게 자를 수 있도록 단단한 물질로 대체하는 것이다. 광학 현미경용 절편에는 파라핀이 가장 많이 사용되며, 전자 현미경용 절편에는 에폭시 수지가 주로 사용된다.

조직의 탈수, 세척, 포매제의 침투가 완료되면 포매 과정이 진행된다. 이 과정에서 조직은 경화되는 액체 포매제와 함께 주형에 넣어진다. 파라핀 왁스는 냉각, 에폭시 수지는 가열을 통해 경화된다. 아크릴 수지는 열, 자외선, 화학 촉매 등으로 중합된다. 굳어진 블록은 박절된다.
포르말린 고정 파라핀 포매 조직(Formalin-fixed paraffin-embedded tissues; FFPE tissues영어)은 실온에서 보존해도 변화가 거의 없고, 핵산도 보호되므로 의학 연구에 중요하다.
포매에는 냉동하여 고정하지 않은 조직을 물 기반 보존액에 담그는 방법도 있다. 이 경우 액체 포매제로는 글리콜 수용액, OCT, TBS, 크리오겔(Cryogel영어), 수지 등이 사용된다.
광학 현미경용 절편은 마이크로톰에 장착된 강철 칼을 사용하여 4um 두께로 잘라 슬라이드 글라스 위에 올린다. 투과형 전자 현미경용으로는 다이아몬드 칼이 달린 울트라 마이크로톰[39]을 사용하여 50nm 절편을 자르고, 지름 3mm의 구리 그리드에 올린다. 얇게 절단된 시료에는 염색이 시행된다.
절편은 다양한 방향으로 만들어진다. 조직의 병리학적 평가에는 수직 절편(조직 표면과 수직으로 절단하여 횡단면을 만듦)[40]이 일반적이다. 모공이나 모낭 피지선 평가에는 수평 절편(또는 횡단 절편)[41]이 사용된다. 수평 접선 절편은 모스 수술 및 CCPDMA 시에 이용된다.[42][43]
플라스틱 포매는 전자 현미경 관찰에 자주 사용된다. 조직은 에폭시 수지 내에 포매된다. 절편은 다이아몬드 또는 유리 칼로 0.1um 이하의 얇은 두께로 잘라낸다. 잘라낸 절편은 전자 밀도가 높은 염료(우라늄 또는 납 등)로 염색되어 전자 현미경으로 관찰된다.
3. 2. 특수 기법
헤마톡실린과 에오신 (H&E 염색)은 조직의 일반적인 구조를 보여주기 위해 조직학에서 가장 일반적으로 사용되는 염색 방법 중 하나이다.[27][15] 일반 염색으로 사용되는 H&E와는 대조적으로, 세포, 세포 구성 요소 및 특정 물질을 보다 선택적으로 염색하는 많은 기술이 있다.[10]조직화학은 염료가 조직의 일반적인 구조가 아닌 특정 화학 성분을 표적으로 사용할 때 사용되는 용어이다.[27] 특정 화학 물질을 표적으로 하는 일반적으로 수행되는 조직화학적 기술은 펄스 프러시안 블루 반응으로, 혈색소침착증과 같은 질병에서 철 침착을 증명하는 데 사용된다.[10] 니스틀 방법을 사용하여 니스틀 소체를 염색하고 골지 염색법 (및 관련 은 염색)은 뉴런을 식별하는 데 유용하다.[10]
역사방사선사진술에서는 슬라이드(때로는 조직화학적으로 염색됨)에 X선을 조사한다. 보다 일반적으로는 자동방사선 촬영술이 신체 내에서 방사성 물질이 수송된 위치를 시각화하는 데 사용된다.[44]
최근 항체는 단백질, 탄수화물, 지질을 특이적으로 시각화하는 데 사용되어 왔다. 이 과정을 면역조직화학이라고 하며, 염료가 형광 분자인 경우에는 면역형광법이라고 한다. 비방사성 ''생체 내'' 혼성화와 같은 다른 고급 기술을 면역화학과 결합하여 사용할 수 있다.[44] 형광 현미경 및 공초점 현미경은 세포 내 세부 사항을 잘 보여주면서 형광 신호를 감지하는 데 사용된다.
전자 현미경 검사를 위해, 조직 절편을 염색하는 데 일반적으로 중금속이 사용된다.[27] 초산 우라닐과 시트르산 납은 전자 현미경에서 조직의 대비를 높이는 데 흔히 사용된다.[27]
급속 동결 절편 절차와 유사하게, '''냉동 절편'''은 조직학을 위해 조직을 빠르게 동결, 절단 및 절편을 제작하는 방법이다. 냉동 절편은 유리 슬라이드에 부착되며, 다른 조직 간의 대비를 향상시키기 위해 염색될 수 있다. 고정되지 않은 냉동 절편은 조직 및 세포 내 효소 국소화를 필요로 하는 연구에 사용될 수 있다. 항체 결합 면역 형광 염색과 같은 특정 절차에는 조직 고정이 필요하다. 냉동 절편은 모스 수술과 같이 종양 절제술 중 종양 경계를 신속하게 식별하거나, 수술 중 우연히 발견된 종양의 악성 여부를 결정하기 위해 종양의 외과적 제거 중에 자주 준비된다.
초미세절단술은 투과 전자 현미경(TEM) 분석을 위해 극도로 얇은 절편을 준비하는 방법이다. 조직은 일반적으로 에폭시 또는 기타 플라스틱 수지에 포함된다.[27] 매우 얇은 절편 (두께 0.1 마이크로미터 미만)은 초미세절단기에서 다이아몬드 또는 유리 칼을 사용하여 절단한다.[10]
4. 조직학의 역사
17세기에 이탈리아의 마르첼로 말피기는 현미경을 사용하여 작은 생물학적 실체를 연구했으며, 일부 사람들은 그를 조직학 및 현미경 병리학 분야의 창시자로 간주한다.[13][23] 말피기는 박쥐, 개구리 및 기타 동물의 여러 기관 부위를 현미경으로 분석했다. 폐의 구조를 연구하면서 말피기는 막으로 된 폐포와 정맥과 동맥 사이의 털과 같은 연결을 발견했는데, 이를 모세혈관이라고 명명했다. 그의 발견은 호흡된 산소가 혈류에 들어가 신체에 어떻게 작용하는지를 밝혀냈다.
19세기에 조직학은 그 자체로 학문 분야가 되었다. 프랑스 해부학자 자비에 비샤는 1801년에 해부학에서 조직의 개념을 도입했고,[20] "조직 연구"를 의미하는 "조직학"(Histologiede)이라는 용어는 1819년 카를 마이어의 책에 처음 등장했다.[18][12][13] 비샤는 21개의 인간 조직을 설명했는데, 이는 현재 조직학자들이 받아들이는 4가지 범주로 요약될 수 있다.[25]
1830년대 초에 얀 에반젤리스타 푸르키네는 고정밀 미세 절단기를 발명했다.[12]
19세기 동안 많은 고정 기술이 개발되었다.
개발자 | 개발 기술 |
---|---|
아돌프 하노버 | 크롬산염 및 크롬산염 및 크롬산 용액 |
프란츠 아일하르트 슐체 및 막스 슐츠 | 오스뮴산 |
알렉산더 부틀레로프 | 포름알데히드 |
베네딕트 스틸링 | 냉동 |
[12]
장착 기술은 루돌프 하이덴하인에 의해 개발되었으며, 그는 아라비아 고무를 도입했다. 잘로몬 슈트리커는 왁스와 오일의 혼합물을 옹호했고, 앤드루 프리처드는 1832년에 고무/피쉬 아교 혼합물을 사용했다. 같은 해에 캐나다 발삼이 등장했고, 1869년 에드윈 클렙스는 수년 동안 표본을 파라핀에 넣었다고 보고했다.[4]
1906년 노벨 생리학·의학상은 조직학자 카밀로 골지와 산티아고 라몬 이 카할에게 수여되었다. 그들은 동일한 이미지에 대한 서로 다른 해석을 바탕으로 뇌의 신경 구조에 대한 상반된 해석을 가지고 있었다. 라몬 이 카할은 그의 정확한 이론으로 상을 받았고, 골지는 그가 개발한 은 염색 기술로 상을 받았는데, 이 기술은 이론을 가능하게 했다.[33]
5. 의학 조직학 (조직병리학)
조직병리학은 질병에 걸린 조직을 현미경으로 식별하고 연구하는 조직학의 한 분야이다.[17][28] 해부 병리학 및 수술 병리학의 중요한 부분이며, 암 및 기타 질병의 정확한 진단에는 종종 조직 샘플의 조직병리학적 검사가 필요하다.[26] 훈련된 의사, 특히 면허를 가진 병리학자들이 조직병리학적 검사를 수행하고 관찰을 기반으로 진단 정보를 제공한다.
6. 미래 전망
체외 조직학(주로 MRI) 기술 개발에 대한 관심이 높아지고 있는데, 이는 의사들이 고정된 조직 표본 대신 살아있는 환자의 건강하고 질병에 걸린 조직에 대한 정보를 비침습적으로 수집할 수 있게 해줄 것이다.[5][6][7][8]
참조
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チラミドシグナル増幅(TSA)
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サーモフィッシャー・サイエンティフィック
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Mast cells granules
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Basophil
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渡辺の鍍銀法 Reticulin silver impregnation
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自治医科大学附属病院 病理診断部・病理診断科
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Neutrophil granules
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Eosinophil granules&mdash
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Basophil granules
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Platelet granules
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Basement membrane
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웹인용
Introduction page, "Anatomy of the Human Body". Henry Gray. 20th edition. 1918
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2007-03-19
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