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최소 필수 배지

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1. 개요

최소 필수 배지(MEM)는 세포 배양에 사용되는 합성 배지 중 하나로, 세포 생존에 필요한 다양한 성분을 제공한다. MEM은 아미노산, 비타민, 무기염류, 포도당 등을 포함하며, 세포의 종류와 배양 조건에 따라 다른 종류의 배지를 사용한다. MEM, BME, MEMa, DMEM 등이 있으며, 각 배지 종류는 구성 성분의 함량에 차이가 있다.

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최소 필수 배지
기본 정보
EMEM
EMEM
특징
종류세포 배양 배지
개발자해리 이글
개발 연도1959년
용도다양한 포유류 세포 배양
기본 구성 성분필수 아미노산
비타민

포도당
추가 성분혈청 (일반적으로 FBS)
항생제
변형
종류α-MEM
DMEM
GMEM
역사
개발 배경1955년, 해리 이글은 L 세포와 헬라 세포 배양에 필요한 특정 아미노산을 밝힘.
이를 바탕으로 더 간단한 배지 개발을 시도.
개발 과정기존 배지(기초 필수 배지)에 특정 영양소를 추가하여 세포 생존율과 성장률을 향상시킴.
혈청 단백질 함량을 줄이기 위해 배지 조성 최적화.
초기 사용폴리오바이러스 연구에 활용
추가 정보
참고 자료[1]
[2]
[3]
[4]
[5]
[6]
[7]
[8]
[9]

2. 구성 성분

최소 필수 배지(MEM)는 아미노산, 비타민, 무기염류, 포도당 등 세포 배양에 필요한 다양한 성분으로 구성된다.[11][12][13][6] 이러한 구성 성분들은 세포의 성장과 생존에 필수적인 역할을 한다. MEM에는 페놀 레드(pH 변화를 시각적으로 확인), 피루브산 나트륨(세포의 에너지 생성), 리포산(세포를 산화 스트레스로부터 보호) 등도 포함되어 있다.

2. 1. 아미노산

아미노산BME[11]MEM[12]α-MEM[13]DMEM[6]
글라이신5030
L-알라닌25
L-아르기닌 염산염2112612684
L-아스파라진-H2O50
L-아스파르트산30
L-시스테인 염산염-H2O100
L-시스틴 2HCl16313163
L-글루탐산75
L-글루타민292292292584
L-히스티딘83142
L-히스티딘 염산염-H2O4242
L-아이소류신265252105
L-류신265252105
L-라이신 염산염36.477373146
L-메사이오닌7.5151530
L-페닐알라닌16.5323266
L-프롤린40
L-세린2542
L-트레오닌24484895
L-트립토판4101016
L-타이로신 이나트륨 이수화물265252104
L-발린23.5464694


2. 2. 비타민

배지BME[11]MEM[12]α-MEMa[13]DMEM[6]
아스코르브산50mg
비오틴1mg0.1mg
염화콜린1mg1mg1mg4mg
D-칼슘 판토텐산염1mg1mg1mg4mg
엽산1mg1mg1mg4mg
나이아신아마이드1mg1mg1mg4mg
피리독살 수화염화물1mg1mg1mg4mg
리보플라빈0.1mg0.1mg0.1mg0.4mg
염산티아민1mg1mg1mg4mg
비타민 B121.36mg
i-이노시톨2mg2mg2mg7.2mg


2. 3. 무기염류

염화 칼슘(CaCl2), 황산 마그네슘(MgSO4), 염화 포타슘(KCl), 탄산수소 나트륨(NaHCO3), 염화 나트륨(NaCl), 인산 일수소 나트륨(NaH2PO4-H2O)은 최소 필수 배지(MEM)를 구성하는 주요 무기염류이다. 각 배지 1리터에 포함된 무기염류의 양(mg)은 다음과 같다.[11][12][13][6]

성분BMEMEMMEMaDMEM
염화 칼슘 (CaCl2)200200200200
황산 마그네슘 (MgSO4)97.6797.6797.6797.67
염화 포타슘 (KCl)400400400400
탄산 수소 나트륨 (NaHCO3)2200220022003700
염화 나트륨 (NaCl)6800680068006400
인산 일수소 나트륨 (NaH2PO4-H2O)140140140125


2. 4. 포도당

D-포도당(덱스트로스)은 BME, MEM, α-MEMa, DMEM 배지에 공통적으로 1리터당 1000mg이 포함되어 있다.[11][12][13][6]

배지BME[11]MEM[12]α-MEMa[13]DMEM[6]
D-포도당 (덱스트로스)1000100010001000


2. 5. 기타 성분

Phenol Red|페놀 레드영어는 pH 변화를 시각적으로 확인하기 위한 지시약으로 사용된다.[11][12][13][6] Sodium pyruvate|피루브산 나트륨영어은 해당 과정의 중간 대사 산물로, 세포의 에너지 생성에 도움을 줄 수 있다.[13][6] Lipoic acid|리포산영어은 항산화 작용을 하는 조효소로, 세포를 산화 스트레스로부터 보호하는 역할을 한다.[13]

2. 6. 배지 구성표

성분BME[11]MEM[12]α-MEM[13]DMEM[6]
글라이신5030
L-알라닌25
L-아르기닌 염산염2112612684
L-아스파라진-H2O50
L-아스파르트산30
L-시스테인 염산염-H2O100
L-시스테인 2HCl16313163
L-글루탐산75
L-글루타민292292292584
L-히스티딘83142
L-히스티딘 염산염-H2O4242
L-아이소류신265252105
L-류신265252105
L-라이신 염산염36.477373146
L-메티오닌7.5151530
L-페닐알라닌16.5323266
L-프롤린40
L-세린2542
L-트레오닌24484895
L-트립토판4101016
L-타이로신 이나트륨 이수화물265252104
L-발린23.5464694
아스코르브산50
비오틴10.1
염화콜린1114
D-판토텐산 칼슘1114
엽산1114
나이아신아마이드1114
피리독살 염산염1114
리보플라빈0.10.10.10.4
티아민 염산염1114
비타민 B121.36
i-이노시톨2227.2
염화 칼슘 (CaCl2, 무수.)200200200200
질산 제이철 (Fe(NO3)3·9H2O)0.1
황산 마그네슘 (MgSO4, 무수.)97.6797.6797.6797.67
염화 포타슘 (KCl)400400400400
탄산수소나트륨 (NaHCO3)2200220022003700
염화 나트륨 (NaCl)6800680068006400
인산 일수소 나트륨 (NaH2PO4-H2O)140140140125
D-포도당 (덱스트로스)1000100010004500
리포산0.2
페놀 레드10101015
피루브산 나트륨110110


3. 주요 배지 종류

세포 배양에 사용되는 최소 필수 배지에는 다음과 같은 종류가 있다.


  • BME (Basal Medium Eagle): 가장 기본적인 배지 중 하나이다.
  • MEM (Minimum Essential Medium): BME보다 아미노산, 비타민 등의 농도가 더 높으며, 다양한 포유류 세포 배양에 사용된다.
  • MEMα (Minimum Essential Medium alpha): MEM의 변형된 형태이다.
  • DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium): BME에서 아미노산과 비타민 농도를 4배, 포도당 농도를 최대 4배까지 높인 배지이다.[6]
  • RPMI 1640 (Roswell Park Memorial Institute medium): 림프 세포 배양에 사용된다.


각 배지에 대한 자세한 성분 조성은 하위 섹션에 표로 정리되어 있다.

3. 1. BME (Basal Medium Eagle)

BME(Basal Medium Eagle)는 최소 필수 배지 중 하나로, 각 배지 1리터에 포함된 성분은 아래 표와 같다.[11]

성분양 (mg)
L-아르기닌 염산염 (L-Arginine hydrochloride)21
L-시스테인 2HCl (L-Cysteine 2HCl)16
L-글루타민 (L-Glutamine)292
L-히스티딘 (L-Histidine)8
L-아이소류신 (L-Isoleucine)26
L-류신 (L-Leucine)26
L-라이신 염산염 (L-Lysine Hydrochloride)36.47
L-메사이오닌 (L-Methionine)7.5
L-페닐알라닌 (L-Phenylalanine)16.5
L-트레오닌 (L-Threonine)24
L-트립토판 (L-Tryptophan)4
L-타이로신 다이나트륨염 이수화물 (Tyrosine Disodium Salt Dihydrate)26
L-발린 (L-Valine)23.5
비오틴 (Biotin)1
염화콜린 (Choline Chloride)1
D-칼슘 판토텐산염 (D-Calcium pantothenate)1
엽산 (Folic Acid)1
나이아신 아마이드 (Niacinamide)1
피리독살 수화염화물 (Pyridoxal hydrochloride)1
리보플라빈 (Riboflavin)0.1
염산치아민 (Thiamine hydrochloride)1
i-이노시톨 (i-Inositol)2
염화 칼슘 (Calcium Chloride, CaCl2)200
황산 마그네슘 (Magnesium Sulfate, MgSO4)97.67
염화 포타슘 (Potassium Chloride, KCl)400
탄산수소 나트륨 (Sodium Bicarbonate, NaHCO3)2200
염화 나트륨 (Sodium Chloride, NaCl)6800
Sodium Phosphate monobasic (NaH2PO4-H2O)140
D-포도당(덱스트로스) (D-Glucose, Dextrose)1000
페놀 레드 (Phenol Red)10


3. 2. MEM (Minimum Essential Medium)

MEM(Minimum Essential Medium)은 BME와 유사하지만, 아미노산, 비타민 등의 농도가 더 높다. MEM은 다양한 포유류 세포 배양에 사용된다.

각 배지 1리터에 포함된 성분은 다음과 같다 (단위: mg).

성분BMEMEMMEMα
글라이신50
L-알라닌25
L-아르기닌 염산염21126126
L-아스파라진-H2O50
L-아스파르트산30
L-시스테인 염산염-H2O100
L-시스테인 2HCl163131
L-글루탐산75
L-글루타민292292292
L-히스티딘831
L-히스티딘 염산염-H2O4242
L-아이소류신265252
L-류신265252
L-라이신 염산염36.477373
L-메사이오닌7.51515
L-페닐알라닌16.53232
L-프롤린40
L-세린25
L-트레오닌244848
L-트립토판41010
L-타이로신 다이나트륨염 이수화물265252
L-발린23.54646
아스코르브산50
비오틴10.1
염화콜린111
D-칼슘 판토텐산염111
엽산111
나이아신 아마이드111
피리독살 수화염화물111
리보플라빈0.10.10.1
티아민 염산염111
비타민 B121.36
i-이노시톨222
염화 칼슘200200200
황산 마그네슘97.6797.6797.67
염화 포타슘400400400
탄산수소나트륨220022002200
염화 나트륨680068006800
인산 나트륨 일염기 (NaH2PO4-H2O)140140140
D-포도당 (덱스트로스)100010001000
리포산0.2
페놀 레드101010
피루브산 소듐110


3. 3. MEMa (Minimum Essential Medium alpha)

MEMa (Minimum Essential Medium alpha)는 세포 배양에 사용되는 배지의 한 종류이다. MEMa 배지 1리터에 포함된 성분과 양 (mg)은 아래 표와 같다.

성분양 (mg)
글라이신 (Glycine)50
L-알라닌 (L-Alanine)25
L-아르기닌 염산염 (L-Arginine hydrochloride)126
L-아스파라진-H2O (L-Asparagine-H2O)50
L-아스파르트산 (L-Aspartic acid)30
L-시스테인 염산염-H2O (L-Cysteine Hydrochloride-H2O)100
L-시스테인 2HCl (L-Cysteine 2HCl)31
L-글루탐산 (L-Glutamate)75
L-글루타민 (L-Glutamine)292
L-히스티딘 (L-Histidine)31
L-히스티딘 염산염-H2O (L-Histidine-H2O)42
L-아이소류신 (L-Isoleucine)52
L-류신 (L-Leucine)52
L-라이신 염산염 (L-Lysine Hydrochloride)73
L-메사이오닌 (L-Methionine)15
L-페닐알라닌 (L-Phenylalanine)32
L-프롤린 (L-Proline)40
L-세린 (L-Serine)25
L-트레오닌 (L-Threonine)48
L-트립토판 (L-Tryptophan)10
L-타이로신 다이나트륨염 이수화물 (Tyrosine Disodium Salt Dihydrate)52
L-발린 (L-Valine)46
아스코르브산 (Ascorbic Acid)50
비오틴 (Biotin)0.1
염화콜린 (Choline Chloride)1
D-칼슘 판토텐산염 (D-Calcium pantothenate)1
엽산 (Folic Acid)1
나이아신 아마이드 (Niacinamide)1
피리독살 수화염화물 (Pyridoxal hydrochloride)1
리보플라빈 (Riboflavin)0.1
염산치아민 (Thiamine hydrochloride)1
비타민 B12 (Vitamin B12)1.36
i-이노시톨 (i-Inositol)2
염화 칼슘 (Calcium Chloride, CaCl2)200
황산 마그네슘 (Magnesium Sulfate, MgSO4)97.67
염화 포타슘 (Potassium Chloride, KCl)400
탄산수소 나트륨 (Sodium Bicarbonate, NaHCO3)2200
염화 나트륨 (Sodium Chloride, NaCl)6800
Sodium Phosphate monobasic (NaH2PO4-H2O)140
D-포도당(덱스트로스) (D-Glucose, Dextrose)1000
리포산 (Lipoic Acid)0.2
페놀 레드 (Phenol Red)10
피루브산 소듐 (Sodium Pyruvate)110


3. 4. DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium)

DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)은 BME 배지에서 아미노산과 비타민 농도를 4배, 포도당 농도를 최대 4배까지 높인 배지이다.[6] DMEM은 원래 포도당 농도가 낮고(1g/L) 피루브산 나트륨이 없지만, 종종 피루브산 나트륨을 첨가하여 제조되기도 한다.[6]

각 배지 리터당 (밀리그램) 성분은 다음과 같다.

성분DMEM[6]
글리신30
L-알라닌25
L-아르기닌 염산염84
L-아스파라긴-H2O50
L-아스파르트산30
L-시스테인 염산염-H2O100
L-시스틴 2HCl63
L-글루탐산75
L-글루타민584
L-히스티딘 염산염-H2O42
L-이소류신105
L-류신105
L-라이신 염산염146
L-메티오닌30
L-페닐알라닌66
L-프롤린40
L-세린42
L-트레오닌95
L-트립토판16
L-티로신 이나트륨 이수화물104
L-발린94
아스코르브산50
비타민 B121.36
염화 콜린4
D-판토텐산 칼슘4
엽산4
니코틴아미드4
염산 피리독살4
리보플라빈0.4
염산 티아민4
i-이노시톨7.2
염화 칼슘 (CaCl2, 무수.)200
질산 제이철 (Fe(NO3)3·9H2O)0.1
황산 마그네슘 (MgSO4, 무수.)97.67
염화 칼륨 (KCl)400
탄산 수소 나트륨 (NaHCO3)3700
염화 나트륨 (NaCl)6400
인산 일수소 나트륨 (NaH2PO4-H2O)125
D-포도당 (덱스트로스)4500
페놀 레드15
피루브산 나트륨110


3. 5. RPMI 1640 (Roswell Park Memorial Institute medium)

RPMI 1640은 Roswell Park Memorial Institute 배지의 약자이며, 림프 세포용 배지이다.

4. 대한민국의 세포 배양 연구 현황 및 과제

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참조

[1] 논문 Amino acid metabolism in mammalian cell cultures. https://pubmed.ncbi.[...]
[2] 논문 Animal-cell culture media: History, characteristics, and current issues. 2017-04
[3] 논문 The specific amino acid requirements of a mammalian cell (strain L) in tissue culture.
[4] 논문 The specific amino acid requirements of a human carcinoma cell (Stain HeLa) in tissue culture
[5] 논문 Plaque production by the polyoma virus
[6] 웹사이트 11885 - DMEM, low glucose, pyruvate (Formulation) https://www.thermofi[...] 2021-12-28
[7] 논문 Two types of ribosome in mouse-hamster hybrid cells
[8] 웹사이트 α-MEM https://www.itwreage[...]
[9] 웹사이트 Alpha MEM with Nucleosides https://www.stemcell[...] Stem Cell Tech.
[10] 웹사이트 Glasgow's Modified Eagle's Medium 51492C https://www.sigmaald[...] 2018-11-04
[11] 웹사이트 Basal Medium Eagle (BME) https://www.thermofi[...]
[12] 웹사이트 MEM https://www.thermofi[...]
[13] 웹사이트 MEM α, no nucleosides https://www.thermofi[...]
[14] 논문 Amino acid metabolism in mammalian cell cultures. https://www.ncbi.nlm[...]
[15] 논문 Animal-cell culture media: History, characteristics, and current issues. 2017-04
[16] 논문 The specific amino acid requirements of a mammalian cell (strain L) in tissue culture. https://www.ncbi.nlm[...]
[17] 논문 The specific amino acid requirements of a human carcinoma cell (Stain HeLa) in tissue culture. https://www.ncbi.nlm[...]
[18] 논문 Amino acid metabolism in mammalian cell cultures. https://www.ncbi.nlm[...]
[19] 논문 Plaque production by the polyoma virus. https://www.ncbi.nlm[...]
[20] 논문 Two types of ribosome in mouse-hamster hybrid cells. https://www.ncbi.nlm[...]
[21] 웹인용 α-MEM https://www.itwreage[...]
[22] 웹인용 Alpha MEM with Nucleosides https://www.stemcell[...] Stem Cell Tech.



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